- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
- 貨號:LZR4218
- 價格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-20
- 更新日期: 2025-01-10
產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號 | LZR4218 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
差異脲原體探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | Ureaplasma diversum | LZR4218 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
枯草芽胞桿菌枯草亞種PCT (Procalcitonin) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis subsp. subtilis
櫟小皮傘APLN (Apelin) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
大腸埃希氏桿菌MMP-11 (Matrix Metalloproteinase 11) ELISA Kit 拉丁屬名: Escherichia coli
枯草芽孢桿菌EGFR (Epidermal Growth Factor Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
鍋孢霉ApoA1 (Apolipoprotein A1) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
栗酒裂殖酵母ApoA2 (Apolipoprotein A2) ELISA Kit拉丁屬名: Schizosaccharomyces pombe
耐輻射奇球菌ApoC3 (Apolipoprotein C3) ELISA Kit拉丁屬名: Deinococcus radiodurans
白僵菌用途: 害蟲生物防治
釀酒酵母BMP-2 (Bone Morphogenetic Protein 2) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
臭曲霉GROα/CXCL1 (Growth Regulated Oncogene Alpha) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus foetidus
冠突曲霉EPO (Erythropoietin) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus cristatus
冷桿菌IFN-γ (Interferon Gamma) ELISA Kit拉丁屬名: Cryobacterium arcticum
聚生殼菌IGF-1 (Insulin-Like Growth Factor 1) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
海洋桿菌IL-1α (Interleukin 1 Alpha) ELISA Kit拉丁屬名: Pontibacter sp.
膜醭畢赤酵母IL-1β (Interleukin 1 Beta) ELISA Kit拉丁屬名: Pichia membranifaciens
差異脲原體探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格人羥脯氨酸(Hyp)ELISA試劑盒英文名稱:Human hydroxyproline,Hyp ELISA Kit進口/原裝
人羥脯氨酸糖蛋白(HRGP)ELISA試劑盒英文名稱:Human Hydroxyproline-Rich Glycoprotein,HRGP ELISA Kit特價供應(yīng)
人橋粒芯糖蛋白-1(DGS-E1)ELISA試劑盒 英文名稱:Human desmogleins 1,DGS-E1 ELISA Kit特價促銷
Pokemon (POK Erythroid Myeloid Ontogenic factor) “蒙”蛋白又稱“波克曼”蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-Axin1 軸蛋白1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-AKT1/2/3 (Tyr315/316/312) 磷酸化蛋白激酶AKT1,2,3 規(guī)格 0.1ml
MMP-9 濃縮液 0.1ml 進口分裝
CD161 英文名稱: CD161 0.1ml
Anti-Phospho-PLC beta3 (Ser1105) 磷酸化磷酯酶Cβ3Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
HO-2(Human heme oxygenase 2) ELISA Kit 人血紅素氧合酶2Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-NuMA 核有絲分裂器NuMA蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh IFNA10/Interferon alpha10/Interferon alpha C 干擾素α10 規(guī)格 0.2ml
GP-BB(Mouse Glycogen phosphorylase BB)ELISA Kit 小鼠糖原磷酸化酶同工酶BB 96T
Prominin 2 英文名稱: 造血干細胞抗原CD133相關(guān)蛋白 0.1ml
BAF53A 英文名稱: 肌動蛋白樣蛋白6A 0.2ml
Anti-Runx3 Runx3Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Human sreum albumin,HSA ELISA Kit 人血清白蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Phospho-Ret (Tyr1062) 磷酸化指狀蛋白RETMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh H Cadherin/CDH13 鈣粘蛋白 規(guī)格 0.2ml
Gzms-B(Mouse granzymes B) ELISA Kit 小鼠顆粒酶B 96T
OTX2 英文名稱: 轉(zhuǎn)錄因子OTX2 0.2ml
CREPT 英文名稱: 高表達細胞周期相關(guān)蛋白 0.2ml
Anti-Integrin alpha 4/CD49d 整合素α4Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
bullfrog growth hormone,GH ELISA Kit 蛙生長激素Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-DEC-205/CD205/Ly75/FITC 熒光素標記CD205IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh CYP11A1/P450SCC 細胞色素P450 11A1 規(guī)格 0.1ml
Mouse IgM/FITC 熒光素標記小鼠IgM 0.3ml
Phospho-LIMK1(Thr508) + LIMK2(Thr505) 英文名稱: 磷酸化單絲酸蛋白激酶1/2 0.1ml