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客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。

PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質粒載體為本領域常規(guī)質粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產品：

假單胞菌屬APO-A1 (Apolipoprotein A1) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas  sp.

豌豆根瘤菌ApoB (Apolipoprotein B) ELISA Kit  拉丁屬名: Rhizobium leguminosarum

毛頭鬼傘，雞腿菇APO-C1 (Apolipoprotein C1) ELISA Kit  注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

釀酒酵母APO-C4 (Apolipoprotein C4) ELISA Kit  拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

緊密假諾卡氏菌APO-E (Apolipoprotein E) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudonocardia compacta

梭菌APO-F (Apolipoprotein F) ELISA Kit 拉丁屬名: septicum

托姆青霉APO-H (Apolipoprotein H) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium thomii

泛酸枝芽胞桿菌ApoB100 (Apolipoprotein B100) ELISA Kit拉丁屬名: Virgibacillus pantothenticus

腫塊芽孢桿菌屬GROγ (Growth Regulated Oncogene Gamma) ELISA Kit拉丁屬名: Tuberibacillus  sp. nov.

栗疫菌AGER (Advanced Glycosylation End Product Specific Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Cryphonectria parasitica

金針菇ANP (Atrial Natriuretic Peptide) ELISA Kit 拉丁屬名: Collybia velutipes (Curt.: Fr.) Quél.

嗜中溫寒冷桿菌bFGF/FGF2 (Basic Fibroblast Growth Factor) ELISA Kit 拉丁屬名: Frigoribacterium mesophilum

釀酒酵母Bcl-2 (B-Cell Leukemia/Lymphoma 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

銀白離褶傘β-EP (Beta-Endorphin) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

果生鏈核盤菌BMP-1 (Bone Morphogenetic Protein 1) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
錐蟲探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格細胞間粘附分子-3 Anti-CD50/ICAM-3 0.1ml

Anti-p-VEGFR2/FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化內皮生長因子受體2IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-GIT1(Tyr510) 磷酸化G蛋白偶聯(lián)受體激酶相互作用蛋白1 規(guī)格 0.1ml

Cdkn1c/p57/Kip2 (Cyclindependent kinase inhibitor 1C) 周期蛋白依賴激酶抑制因子1C抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

人肌抑素(MSTN)ELISA試劑盒英文名稱：Human Myostatin,MSTN ELISA Kit/原裝

人基膜聚糖/內腔蛋白(LUM)ELISA試劑盒英文名稱：Human lumican,LUM ELISA Kit特價促銷

人基質γ羧基谷氨酸蛋白(MGP)ELISA試劑盒 英文名稱：Human Matrix Gla Protein,MGP ELISA Kit特價促銷

CD137 英文名稱： 壞死因子受體超家族成員9 0.1ml

Anti-IFN-Beta 干擾素-β(抗人)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

ATMA/TMAB(Human Anti-Thyroid Microsome Antibody) ELISA KIT 人抗甲狀腺微粒體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-IL-6R Alpha 白細胞介素6受體αMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh LPLUNC1 癌基因 規(guī)格 0.1ml

GPI(Human glycophosphatidylinositol) ELISA Kit 人糖磷脂酰肌醇 96T

RAP1A 英文名稱： 抗Rap1A 0.1ml

DIRAS2 英文名稱： DIRAS2蛋白 0.2ml

Anti-Anthrax 炭疽桿菌Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

EAAT4 英文名稱： 膠質細胞谷酸運載蛋白4 0.2ml

臂板蛋白4C Anti-Sema4C 0.2ml

Anti-TBX2/T-box2/FITC 熒光素標記新型基因IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-MEF2A(Thr319) 磷酸化肌細胞增強因子2 規(guī)格 0.1ml

AQP9(aquaporin Protein-9) 水通道蛋白-9抗原 (多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

CRCT1 英文名稱： 富含半胱酸C端蛋白1 0.2ml

Anti-GM-CSF 粒細胞-巨噬細胞克隆刺激因子Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

NT-3 ELISA Kit 人神經營養(yǎng)因子3Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-GM-CSFR alpha/CD116 粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子受體αMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Mouse anti-Bovine IgG ascites 小鼠抗IgG腹水 規(guī)格 1ml

sMHC-1(Human soluble myosin heavy chain 1) ELISA Kit 人可溶性肌球蛋白重鏈1 96T

RNA polymerase II CTD repeat YSPTSPS (phospho S2) 英文名稱： 磷酸化RNA聚合酶II CTD 0.1ml