產地 | 進口、國產 |
品牌 | 聯祖 |
貨號 | LZR4178 |
用途 | 公司產品僅用于科研 |
包裝規格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
米氏旋毛蟲探針法熒光定量PCR試劑盒規格 | Trichinella murrelli | LZR4178 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環步驟 | 溫度 | 時間 | 循環數 |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產品:
牛肝菌Sheep PCIII (Procollagen III) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
雜色曲霉Sheep ALB (Albumin) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus versicolor
肉毒梭菌 毒素C型Sheep BFP (Brain Finger Protein) ELISA Kit 拉丁屬名: botulinum Type C
福氏嗜冷桿菌Sheep UBD (Ubiquitin D) ELISA Kit拉丁屬名: Psychrobacter fozii
互生頂孢霉Sheep C1q-Ab (Anti-Complement 1q Antibody) ELISA Kit用途: 代謝產物
紅假單胞菌屬Sheep NOX4 (Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 4) ELISA Kit拉丁屬名: Rhodopseudomonas pseudopalustris
膠韌革菌Sheep CPP (Copeptin) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
多變鏈霉菌Sheep IgG2 (Immunoglobulin G2) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces variegatus
莫哈韋芽孢桿菌Sheep BMP-1 (Bone Morphogenetic Protein 1) ELISA Kit 用途: 固氮
枝狀枝孢Sheep FSA (Fetal Sulfoslycoprotein Antigen) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
枯草芽胞桿菌Sheep AKAP1 (A Kinase Anchor Protein 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis
短莖青霉Sheep Tyk-2 (Tyrosine Kinase 2) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium brevistipitatum
迷宮栓孔菌Sheep SEMA3A (Semaphorin 3A) ELISA Kit拉丁屬名: Trametes gibbosa
頂孢頭孢霉Sheep PP (Placental Protein) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
微小桿菌Sheep CNP (C-type Natriuretic Peptide) ELISA Kit拉丁屬名: Microvirga sp.
米氏旋毛蟲探針法熒光定量PCR試劑盒規格Rhesus antibody Rh phospho-FRS2(Tyr436) 磷酸化成纖維細胞生長因子受體底物2 規格 0.1ml
CKIP-1(casein kinase 2 interaction protein 1) 酪蛋白激酶2相互作用蛋白1抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg
人降解加速因子(DAF)ELISA試劑盒英文名稱:Human decay-accelerating factor,DAF ELISA Kit 特價供應
人膠原吡啶交聯(PYD)ELISA試劑盒 英文名稱:Human Pyridinoline crosslinks,PYD ELISA Kit進口/分裝
人膠原蛋白Ⅱ(HCBⅡ)ELISA試劑盒英文名稱:Human Collagen-like Bioprotein Ⅱ,HCBⅡ ELISA Kit特價促銷
人膠原酶I(Collagenase I)ELISA試劑盒 英文名稱:Human Collagenase I ELISA Kit進口/原裝
人膠原酶II(Collagenase II)ELISA試劑盒英文名稱:Human Collagenase Type II ELISA Kit進口/原裝
CCL26 英文名稱: C-C元件趨化因子26 0.2ml
Anti-HSD11B2/HSD2 羥基類固醇脫氫酶11β2Multi-class antibodies規格: 0.2ml
AhCGAb(Human anti-chorionic gonadotropin-antibody) ELISA Kit 人抗染色體Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-phospho-IKK gamma (Ser85) 磷酸化KB抑制蛋白激酶γMulti-class antibodies規格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh MAGE-1 相關抗原 規格 0.1ml
C I CP(Human cross-linked C-telopeptides of Type I collagen) ELISA Kit 人Ⅰ型前膠原C末端肽 96T
RAD9 英文名稱: 細胞周期檢查控制蛋白質 0.1ml
Angiomotin 英文名稱: 動蛋白 0.2ml
Anti-Calponin 1/FITC 熒光素標記鈣調節蛋白-1IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
TAT(Mouse thrombin-antithrombin complex) ELISA Kit 小鼠凝血酶抗凝血酶復合物Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-CD44/FITC 熒光素標記CD44IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh DSCC1 DSCC1蛋白 規格 0.2ml
Mouse anti-red cell antibody ELISA Kit 小鼠抗紅細胞 96T
MPP1 英文名稱: 紅細胞膜蛋白55 0.2ml
COX1 英文名稱: 細胞色素c氧化酶1 0.2ml
Anti-PEPT1 腸道肽轉運蛋白1/小肽轉運蛋白1Multi-class antibodies規格: 0.1ml
UFC(Human urinary free cortisol) ELISA Kit 人尿游離皮質醇Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-PEPT2/SLC15A2 腸道肽轉運蛋白2Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Histone H3-like protein 組蛋白H3樣 規格 0.2ml
MHC II /AgB II /H-1 II ELISA Kit 大鼠主要組織相容性復合體Ⅱ類 96T
PBX1 英文名稱: B淋巴細胞前體蛋白轉錄因子1 0.2ml