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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
螺旋體亞種探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:LZR4171
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-20
  • 更新日期: 2025-01-10
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號 LZR4171
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

螺旋體亞種探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

Treponema pallidum subsp. Pallidum

LZR4171

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

蔗糖伯克霍爾德氏菌Sheep PC (Plasma Anticoagulant Protein C) ELISA Kit拉丁屬名: Burkholderia sacchari

醋化醋桿菌Sheep GPC3 (Glypican 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Acetobacter aceti

芽孢桿菌Sheep GSANA (Granulocyte Specific Anti-Nuclear Antibody) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

雜色曲霉Sheep ACA-IgG (Anti-Cardiolipin Antibody IgG) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus versicolor

嗜鹽長單胞菌 Sheep LAP (Leucine Aminopeptidase) ELISA Kit拉丁屬名: Longimonas halophila

多主枝孢Sheep CK-18/KRT18 (Cytokeratin 18) ELISA Kit拉丁屬名: Cladosporium herbarum (Persoon) Link et Fries

淡紫灰鏈霉菌Sheep TGM2 (Transglutaminase 2, Tissue) ELISA Kit用途: 代謝產(chǎn)物具有抗菌活性。

枯草芽孢桿菌Sheep PYY (Peptide YY) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis

黃褐環(huán)銹傘Sheep TSLP (Thymic Stromal Lymphopoietin) ELISA Kit 拉丁屬名: Pholiota spumosa

大腸埃希氏菌Sheep SGK2 (Serum/Glucocorticoid Regulated Kinase 2) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli

釀酒酵母Sheep PTH (Parathyroid Hormone) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

鹽田鹽單胞菌Sheep APT (Abnormal Prothrombin) ELISA Kit拉丁屬名: Halomonas campisalis

大豆慢生根瘤菌Sheep GTF2B (General Transcription Factor IIB) ELISA Kit用途: 與大豆共生固氮

黃曲霉Sheep τPK1 (Tau-Protein Kinase) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus  flavus

大腸埃希菌Sheep ANG (Angiogenin) ELISA Kit拉丁屬名: coli
螺旋體亞種探針法熒光定量PCR試劑盒說明書FAST kinase(Fas-activated serine/threonine kinase) Fas活化的絲/蘇氨酸激酶抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

骨形態(tài)發(fā)生蛋白4 Anti-BMP4 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-E2F1 (Ser364) 磷酸化轉(zhuǎn)錄因子E2F-1 規(guī)格 0.1ml

X射線攝影暗匣5*7+增感屏 套

ZNF81 英文名稱: 鋅指蛋白81 0.2ml

phospho-DAP Kinase 2 (Ser318) 英文名稱: 磷酸化凋亡相關(guān)蛋白激酶2 0.1ml

骨形態(tài)發(fā)生蛋白4 Anti-BMP4 0.1ml

CCKBR 英文名稱: 促胃泌素受體 0.1ml

Anti-Phospho-EGFR(Thr669) 磷酸化表皮生長因子受體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

PARC/CCL18(Human pulmonary activation regulated chemokine) ELISA Kit 人肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-phospho-FOXO4 (Ser197) 磷酸化叉頭蛋白4Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh Mouse Anti-human IgM/FITC FITC標記的小鼠抗人IgM 規(guī)格 0.1ml

C/EBP Alpha(Human CCAAT/enhancer binding protein alpha) ELISA Kit 人CCAAT增強子結(jié)合蛋白α 96T

SPOCK2 英文名稱: 蛋白聚糖2 0.2ml

Rhesus antibody Rh NPC1/Niemann Pick C1 尼曼匹克C1前體蛋白 規(guī)格 0.2ml

Col I (Human Collagen Type I ) ELISA Kit 人Ⅰ型膠原 96T

TPX2 英文名稱: 微管相關(guān)同源蛋白TPX2 0.2ml

C6orf225 英文名稱: 6號染色體開放閱讀框225 0.2ml

Anti-phospho C-Met/HGFR(Tyr1365) 磷酸化原癌基因c-MetMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine E-Selectin ELISA Kit進口/原裝

α干擾素(IFN-α)ELISA試劑盒 英文名稱:Porcine Interferon α,IFN-α ELISA Kit特價促銷

Coronin 1a 英文名稱: 肌動蛋白結(jié)合蛋白CORO1A 0.1ml

Anti-Phospho-NMDAR1 (Ser890) 磷酸化谷氨酸受體1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

AhCGAb(Human anti-chorionic gonadotropin-antibody) ELISA Kit 人抗人絨毛膜激素Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-phospho-IKK beta (Tyr199) 磷酸化KB抑制蛋白激酶βMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh MAGEA10 相關(guān)抗原10 規(guī)格 0.2ml

DPD(Human deoxypyridinoline) ELISA Kit 人脫氧酚/脫氧啉 96T

phospho-RAD9(Ser272) 英文名稱: 磷酸化細胞周期檢查控制蛋白質(zhì) 0.1ml

 


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