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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
東方泰勒蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
  • 品牌:聯祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:LZR4161
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-20
  • 更新日期: 2025-01-10
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 聯祖
貨號 LZR4161
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產品名稱

英文名稱

貨號

東方泰勒蟲探針法熒光定量PCR試劑盒

Theileria orientalis

LZR4161

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產品:

大腸埃希菌Sheep GDF9 (Growth Differentiation Factor 9) ELISA Kit 拉丁屬名: coli

癭青霉Sheep CA153 (Carbohydrate Antigen 153) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium fellutanum

膜醭假絲酵母Sheep PA-IgM (Platelet Associated Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Candida membranifaciens

香菇Sheep ADA (Adenosine Deaminase) ELISA Kit用途: 食用、藥用

芽孢桿菌Sheep SNCα (Synuclein Alpha) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

白色類諾卡氏菌Sheep EPOR (Erythropoietin Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Nocardioides albus

冷桿菌Sheep ANG II R1/AGTR1 (Angiotensin II Receptor 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Cryobacterium  arcticum

棘抱曲霉Sheep CCL16 (Chemokine C-C-Motif Ligand 16) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus  aculeatus

氨桿菌Sheep THRSP (Thyroid Hormone Responsive) ELISA Kit拉丁屬名: Sphingobacterium  wenxiniae

鹽索氏菌Sheep CHAc (Choline acetylase) ELISA Kit拉丁屬名: Thauera phenylacetica

植物乳桿菌Sheep GSP (Glycosylated Serum Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus  plantarum

產氣莢膜梭菌       毒素C型Sheep F8 (Coagulation Factor Ⅷ) ELISA Kit拉丁屬名: perfringens       Type C

類布氏乳桿菌Sheep EK (Eepidermal Keratin) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus  parabuchneri

球孢白僵菌Sheep PGD2S (Prostaglandin D2 Synthase, Brain) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

土壤球菌Sheep AGA (Anti-Glycolipid Antibody) ELISA Kit用途: 分類、研究,具有用作耐重金屬基因資源潛力。
東方泰勒蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 ABHD4 英文名稱: α/β水解酶4 0.2ml

Anti-CD84/SLAMF5/FITC 熒光素標記CD84IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml

t-PA ELISA Kit 大鼠組織型纖溶酶原激活劑Multi-class antibodies規格: 48T

Anti-ADNP/FITC 熒光素標記活性依賴的神經保護肽IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh FEN1 結構特異性核酸酶FEN1 規格 0.2ml

ODF(Mouse osteoclast differentiation factor) ELISA Kit 小鼠破骨細胞分化因子 96T

MGLUR3 英文名稱: 代謝型谷酸受體-3 0.2ml

CCDC89 英文名稱: 卷曲螺旋結構域蛋白89 0.2ml

Anti-KLK14 激肽釋放酶14Multi-class antibodies規格: 0.2ml

PC(Human plasma anticoagulant protein C) ELISA Kit 人血漿抗凝蛋白CMulti-class antibodies規格: 48T

Anti-RACK1 受體激活蛋白激酶C1Multi-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh HDBP2/PTTG1IP 瘤病毒調控因子1(鋅指蛋白395) 規格 0.2ml

AQP-2 ELISA Kit 大鼠水通道蛋白2 96T

P51A 英文名稱: 抑制基因p63α 0.1ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-dog IgG/PE-CY5 PE-CY5標記的兔抗狗IgG 規格 0.1ml

Anti-phospho-STAT3 (Ser727) /FITC 熒光素標記磷酸化信號轉導和轉錄激活因子3IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml

NADPH ELISA Kit 大鼠煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸Multi-class antibodies規格: 48T

Anti-AVPR2/FITC 熒光素標記精氨酸加壓素受體2IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh EVC2 膜蛋白EVC2 規格 0.1ml

CSF(Human colony-stimulating factor) ELISA Kit 人集落刺激因子 96T

Met Enkephalin 英文名稱: 甲硫酸腦啡肽 0.2ml

Connexin-45 英文名稱: 間隙連接蛋白45 0.1ml

Anti-Nogo-B/A 軸索過度生長抑制因子-B/AMulti-class antibodies規格: 0.1ml

RV(Human RotavirusIgM) ELISA Kit 人輪狀病毒IgMMulti-class antibodies規格: 48T

Anti-mu Opioid receptor μ-型受體Multi-class antibodies規格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh LANCL2 G蛋白偶聯受體69B 規格 0.2ml

ER(Human Estradiol receptor) ELISA Kit 人雌二醇受體 96T

P2RX7 英文名稱: 嘌呤受體P2X7 0.2ml


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