產地 | 進口、國產 |
品牌 | 聯祖 |
貨號 | LZR4149 |
用途 | 公司產品僅用于科研 |
包裝規格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
馬生殖泰勒氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒 | Taylorella equigenitalis | LZR4149 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環步驟 | 溫度 | 時間 | 循環數 |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產品:
粟酒裂殖酵母Sheep MAP2K1 (Mitogen Activated Protein Kinase Kinase 1) ELISA Kit拉丁屬名: Schizosaccharomyces pombe
光硬皮馬勃Sheep TAP (Transporter Associated with Antigen Processing) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
路普康湖冷桿菌Sheep CASP7 (Caspase 7) ELISA Kit拉丁屬名: Cryobacterium roopkundense
指狀青霉Sheep AQP-4 (Aquaporin 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Penicillium digitatum
Paraconiothyrium hawaiiense Sheep GALR1 (Galanin Receptor 1) ELISA Kit 用途: 植物內生真菌
串珠鐮孢Sheep ApoA1 (Apolipoprotein A1) ELISA Kit拉丁屬名: Fusarium moniliforme
白地霉Sheep E2 (Estradiol) ELISA Kit拉丁屬名: Geotrichum candidum
耐久腸球菌Sheep CAPA (Cytotoxin Associated Protein A) ELISA Kit拉丁屬名: Enterococcus durans
科恩根霉Sheep PRKAα1 (Protein Kinase, AMP Activated Alpha 1) ELISA Kit 用途: 制葡萄糖用菌,產生葡萄糖苷酶
固氮菌Sheep ProGRP (Pro-Gastrin Releasing Peptide) ELISA Kit拉丁屬名: Azotobacter sp.
枯草芽孢桿菌Sheep PMP3 (Peroxisomal Membrane Protein 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis
釀酒酵母Sheep CYSLTR2 (Cysteinyl Leukotriene Receptor 2) ELISA Kit 用途: 發酵啤酒易清
人參土成對桿菌Sheep RB1 (Retinoblastoma Protein 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Dyadobacter sp.
節桿菌Sheep CTSL (Cathepsin L) ELISA Kit 拉丁屬名: Arthrobacter sp.
枯草芽孢桿菌Sheep ERβ (Estrogen Receptor Beta) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
馬生殖泰勒氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒 ATP7B 英文名稱: 銅轉運蛋白質β鏈 0.1ml
Anti- Alpha-ACTN4/FITC 熒光素標記抗α-輔肌動蛋白4IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
PPAR- Alpha(Mouse peroxisome proliferators activator receptors alpha) ELISA Kit 小鼠過氧化物酶體增殖物激活受體αMulti-class antibodies規格: 48T
Anti-Cav-1/FITC 熒光素標記抗小凹蛋白IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh EID1 乙酰基轉移酶EID1 規格 0.2ml
(CTX- I )ELISA Kit 大鼠Ⅰ型膠原C端肽 96T
MESP1 英文名稱: 心發育中胚層相關蛋白1 0.2ml
CCDC67 英文名稱: 卷曲螺旋結構域蛋白67 0.2ml
Anti-KLH 血藍蛋白Multi-class antibodies規格: 0.1ml
ADV-IgM(Human Adenovirus IgM) ELISA Kit 人腺病毒IgMMulti-class antibodies規格: 48T
Anti-KLK1 激肽釋放酶1Multi-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh LANPL 富含亮氨酸樣酸性核蛋白 規格 0.2ml
NKA ELISA Kit(Ret) 大鼠神經肽A 96T
P2RX5 英文名稱: 三磷酸腺苷受體P2X5 0.2ml
Human IPO-38 ELISA Kit 人IPO-38蛋白 96T
Transglutaminase 2 英文名稱: 谷酰胺轉胺酶2 0.2ml
CLEC2/CLEC1B 英文名稱: C型凝集素結構域家族1成員B 0.2ml
Anti-CYP21 膽固醇21-羥化酶Multi-class antibodies規格: 0.2ml
小鼠表面(HBsAb)ELISA試劑盒 英文名稱:Mouse hepatitis B virus surface antibody,HBsAb ELISA Kit進口/分裝
小鼠表面抗原(HBsAg)ELISA試劑盒 英文名稱:Mouse hepatitis B virus surface antigen,HBsAg ELISA Kit特價促銷
小鼠核心(HBcAb)ELISA試劑盒 英文名稱:Mouse hepatitis B virus core antibody,HBcAb ELISA Kit進口/原裝
Complement C3g fragment 英文名稱: 補體C3g片段 0.1ml
Anti-Hemagglutinin (H2N2) 病毒血凝素(H2N2)Multi-class antibodies規格: 0.2ml
OX-B(Human Orexin B) ELISA Kit 人食欲素/阿立新BMulti-class antibodies規格: 48T
Anti-Influenza A Virus Hemagglutinin 甲型病毒血凝素Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh MMAA/cblA 甲基尿癥cblA 規格 0.2ml
PI3K(Human Phosphotylinosital 3 kinase) ELISA Kit 人磷酸肌醇3激酶 96T
phospho-RGS19(Ser24) 英文名稱: 磷酸化G蛋白信號轉導調節因子19 0.1ml