- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
- 貨號:LZR4143
- 價格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-20
- 更新日期: 2025-01-10
產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號 | LZR4143 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
鏈狀帶探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | Taenia solium | LZR4143 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
長枝木霉Sheep FBN2 (Fibrillin 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Trichoderma longibrachiatum
副短短芽孢桿菌Sheep cPLA2 (Cytosolic Phospholipase A2) ELISA Kit拉丁屬名: Brevibacillus parabrevis
栗色渾圓鏈霉菌Sheep Gal-6S (Galactose-6-Sulphatase) ELISA Kit用途: 代謝產(chǎn)物具有弱活性。
茶色銀耳Sheep VIP (Vasoactive Intestinal Peptide) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
靈芝Sheep PLA2R1 (Phospholipase A2 Receptor 1) ELISA Kit拉丁屬名: Ganoderma lucidium
產(chǎn)氣莢膜梭菌 毒素C型Sheep IgG1 (Immunoglobulin G1) ELISA Kit拉丁屬名: perfringens Type C
糞腸球菌Sheep CYP1A2 (Cytochrome P450 1A2) ELISA Kit 拉丁屬名: Enterococcus faecalis
炭黑曲霉Sheep ApoC1 (Apolipoprotein C1) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus carbonarius
釀酒酵母Sheep Sp17 (Sperm Protein 17) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
黑曲霉Sheep γ-ECS (γ-Glutamyl Systeine Synthetase) ELISA Kit用途: 抑菌試驗用
三葉草根瘤菌Sheep Surv (Survivin) ELISA Kit用途: 與三葉草共生固氮
深紅酵母Sheep NLR (NOD-Like Receptor9) ELISA Kit拉丁屬名: Rhodotorula rubra
褐囊蜜環(huán)菌Sheep SA (Sialic Acid) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
秦氏蜜環(huán)菌Sheep M-AChR M2 (Muscarinic Acetylcholine Receptor M2) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
硬水黃桿菌Sheep NT-4 (Neurotrophin 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Flavobacterium aquidurense
鏈狀帶探針法熒光定量PCR試劑盒說明書phospho-CSK (Ser364) 英文名稱: 磷酸化酪酸激酶C-SRC 0.1ml
Anti(c-phycocyanin C-藻藍素/藻藍蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
SSTR2 (somatostatin receptor 2) 生長抑素受體2抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-phospho-B-Raf (Ser365) 磷酸化B-RafMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Peptide YY/PYY 酪酪肽 規(guī)格 0.2ml
CD117 濃縮液 0.1ml 進口分裝
TNK1 英文名稱: 非受體型酪酸蛋白激酶Tnk1 0.1ml
CCDC61 英文名稱: 卷曲螺旋結構域蛋白61 0.2ml
Anti-P14ARF 基因p14Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
PCT(Human Procalcitonin) ELISA Kit 人降鈣素原Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-LAIR-1/CD305 白細胞相關免疫球蛋白樣受體1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh KY/Kyphoscoliosis peptidase 脊柱側后凸畸形肽酶 規(guī)格 0.2ml
IFN- Gamma ELISA Kit 大鼠γ干擾素 96T
phospho-PP2A alpha (Tyr307) 英文名稱: 磷酸化蛋白磷酸酶2A(PP2Aα) 0.1ml
c-Maf 英文名稱: 原癌基因cMAF 0.1ml
Anti-Phospho-CENP-A (Ser7) 磷酸化著絲粒蛋白AMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Collagen III 人III型膠原Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-phospho-c-Jun (Thr93) 磷酸化原癌基因c-JunMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh NTAL B淋巴細胞鏈接激活蛋白 規(guī)格 0.2ml
T4 Polynucleotide Kinase T4 DNA 激酶 22ul (20次反應)
TIMP-4 英文名稱: 金屬蛋白酶組織抑制因子-4 0.1ml
Complement C3 英文名稱: 補體C3a過敏毒素 0.1ml
Anti-NKA 神經(jīng)激肽AMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
CRP(Human C-Reactive Protein) ELISA Kit 人C反應蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-PAFAH2/Lp-PLA2 脂蛋白磷脂酶A2Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh HPV16-E7 人類狀瘤病毒16-E7 規(guī)格 0.2ml
LTC4(Mouse Leukotriene C4) ELISA Kit 小鼠白三烯C4 96T
Phospho-PAR4 (Thr163) 英文名稱: 磷酸化蛋白酶活化受體4 0.1ml