產地 | 進口、國產 |
品牌 | 聯祖 |
貨號 | LZR4141 |
用途 | 公司產品僅用于科研 |
包裝規格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環步驟 | 溫度 | 時間 | 循環數 |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
氣管比翼線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 | Syngamus trachea | LZR4141 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
以下列是公司正在熱銷的產品:
根瘤菌屬Sheep ApoF (Apolipoprotein F) ELISA Kit 拉丁屬名: Rhizobium sp.
彎孢菌Sheep GP4 (Platelet Membrane Glycoprotein IV) ELISA Kit用途: 研究
紅酵母屬Sheep FOXP1 (Forkhead Box Protein P1) ELISA Kit 拉丁屬名: Rhodotorula sp.
球孢白僵菌Sheep ECM1 (Extracellular Matrix Protein 1) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
松杉靈芝Sheep PAR2 (Protease Activated Receptor 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Ganoderma tsugae Murrill
腐皮鐮孢Sheep HSP-70/HSPA9 (Heat Shock Protein 70) ELISA Kit拉丁屬名: Fusarium solani
灰樹花(可訂購)斜面形式Sheep UCP-2 (Uncoupling Protein 2, Mitochondrial) ELISA Kit拉丁屬名: Grifola frondosa (Fr.) S.F.Gray
聚生殼菌Sheep CETP (Cholesteryl Ester Transfer Protein) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
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羅伊氏乳桿菌Sheep PGD2-MOX (Prostaglandin D2-Methoxime) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus reuteri
粉紅鉚釘菇Sheep AGT (Angiotensinogen) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
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大腸埃希菌Sheep Alk-Smase (Alkaline Sphingomyelinase) ELISA Kit拉丁屬名: coli
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CCDC58 英文名稱: 卷曲螺旋結構域蛋白58 0.2ml
Anti-FOXJ1/HFH-4 叉頭蛋白J1Multi-class antibodies規格: 0.1ml
CTAP III (Human connective tissue-activating peptide III ,CTAP III ) ELISA Kit 人結締組織活化肽ⅢMulti-class antibodies規格: 48T
Anti-FOXF1 叉頭蛋白F1Multi-class antibodies規格: 0.2ml
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人細胞毒素(CTX)ELISA試劑盒 英文名稱:Human cytotoxin,CTX ELISA Kit特價促銷
人細胞毒素相關蛋白A(CagA)ELISA試劑盒 英文名稱:Human Cytotoxin-associated protein,CagA ELISA Kit特價促銷
人細胞毒性T淋巴細胞相關抗原4(CTLA-4/CD152)ELISA試劑盒 英文名稱:Human cytotoxic T lymphocyte associated antigen 4,CTLA-4 ELISA Kit特價促銷
人細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA試劑盒 英文名稱:Human intercellular adhesion molecule 1,ICAM-1 ELISA Kit特價促銷
PAR-2 (Protease-activated receptors-2) 蛋白酶激活受體-2抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg
Anti-phospho-ATF2(Thr69/71) 磷酸化活化復制因子2Multi-class antibodies規格: 0.1ml
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Anti-Phospho-PKA C (Thr197) 磷酸化蛋白激酶C亞性Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh HIP4/CBS 絲氨酸羧甲半胱氨酸合成酶 規格 0.1ml
Gelsolin ELISA Kit 大鼠凝溶膠蛋白 96T
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