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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR4139
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-01-10
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR4139 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
豬病毒探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | Swine Papillomavirus | LZR4139 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
纖細(xì)屈曲海生菌Sheep PDGFA (Platelet Derived Growth Factor Subunit A ) ELISA Kit 拉丁屬名: Ancylomarina subtile
毛束霉Sheep COL10 (Collagen Type X) ELISA Kit 拉丁屬名: Trichurus spiralis
屎腸球菌Sheep LTA (Lymphotoxin α)ELISA Kit拉丁屬名: Enterococcus faecium
金針菇Sheep CKMT1B (Creatine Kinase, Mitochondrial 1B ) ELISA Kit 拉丁屬名: Collybia velutipes(Curt.:Fr.)Quel.
干酪乳桿菌Sheep MYD88 (Myeloid Differentiation Factor 88) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus casei
枯斑擬盤多毛孢Sheep PKBG (Protein Kinase B Gamma) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
Lactococcus sp.Sheep AIF (Apoptosis Inducing Factor) ELISA Kit拉丁屬名: Lactococcus sp.
匍匐曲霉Sheep CYTH1 (Cytohesin 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus repens
草酸青霉Sheep BTA (Bladder Tumor Antigen) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium oxalicum
PseudarthrobacterSheep C3a (Complement Component 3a) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudarthrobacter siccitolerans
糞纖維單胞菌Sheep AQP-3 (Aquaporin 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Cellulomonas fimi
污黑腐皮殼Sheep OSCAR (Osteoclast Associated Receptor) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
平菇新宇711Sheep COL4 (Collagen Type IV) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
少根根霉Sheep tPA (Plasminogen Activator, Tissue) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizopus arrhizus
米曲霉Sheep PDIA6 (Protein Disulfide Isomerase A6) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus oryzae
豬病毒探針法熒光定量PCR試劑盒說明書IFN-r 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
Ubiquitously expressed transcript 英文名稱： 廣泛表達(dá)轉(zhuǎn)錄蛋白UXT 0.2ml
DPEP3 英文名稱： 膜二肽酶3 0.2ml
Anti-Arfaptin 1 ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
ERAB 英文名稱： 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Aβ相關(guān)結(jié)合蛋白 0.1ml
組織蛋白酶E Anti-cath-E/CE 0.1ml
Anti-Urocortin 3/FITC 熒光素標(biāo)記尿皮質(zhì)素UCN3IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
CCDC54 英文名稱： 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白54 0.2ml
Anti-P16 基因p16Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Agtr I a(Human angiotensin II receptor type I a) ELISA Kit 人緊張素Ⅱ受體Ⅰa型Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-p53BP1/53BP1 p53結(jié)合蛋白1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh HSP70/HSPA1A 熱休克蛋白-70 規(guī)格 0.1ml
hnRNP/RA33(Human heterogeneous nuclear ribonucleoprotein compies/anti-RA33-antibody) ELISA Kit 人異質(zhì)型核糖核蛋白復(fù)合物/抗RA33 96T
PRAS40 英文名稱： 蛋白激酶AKT底物1 0.2ml
人粒細(xì)胞特異性抗核(GS-ANA)ELISA試劑盒 英文名稱：Human granulocyte specific antinuclear antibody，GS-ANA ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
人內(nèi)阿米巴抗原ELISA試劑盒英文名稱：Human Entamoeba histolytica Antigen ELISA Kit特價(jià)促銷
人鏈激酶(SK)ELISA試劑盒 英文名稱：Human Streptokinase,SK ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
S100B S100B蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5ml
Anti-Bcl-10/CLAP Bcl-10Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh PHGDH 磷酸甘油酸脫氫酶 規(guī)格 0.2ml
IGF-1R 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
COMMD8 英文名稱： 銅代謝結(jié)構(gòu)域蛋白8 0.2ml
Anti-PFK2/PFKFB3 6磷酸果糖激酶2Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
EBv IgM(Human epstein-barr virus IgM) ELISA Kit 人EB病毒IgMMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-KLF6 轉(zhuǎn)染基因KLF6Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh large S protein 人乙毒pre S1/S2蛋白 規(guī)格 0.1ml
Glycoprotein VI(Human ) ELISA Kit 人糖蛋白VI 96T
PSGR 英文名稱： 特異性G蛋白偶聯(lián)受體/嗅覺受體51E2 0.1ml
