產地 | 進口、國產 |
品牌 | 聯祖 |
貨號 | LZR4137 |
用途 | 公司產品僅用于科研 |
包裝規格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
布氏錐尾線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 | Subulura brumpti | LZR4137 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環步驟 | 溫度 | 時間 | 循環數 |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產品:
金頂側耳Sheep PTPRO (Protein Tyrosine Phosphatase Receptor Type O) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
炭疽芽孢桿菌Sheep SPJ (Surfactant Associated Protein J) ELISA Kit拉丁屬名: anthracis
淺灰白鏈霉菌Sheep PROZ (Protein Z) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces griseoloalbus
蠟狀芽孢桿菌Sheep DEFα5 (Defensin Alpha 5, Paneth Cell Specific) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus cereus
淡青鏈霉菌Sheep ADH (Antidiuretic Hormone) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces glaucescens
大腸埃希氏菌Sheep TP (Thymidine Phosphorylase) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli
青藍馬杜拉放線菌Sheep S100A7 (S100 Calcium Binding Protein A7) ELISA Kit拉丁屬名: Actinomadura coerulea
毛霉屬Sheep TPP1 (Tripeptidyl Peptidase I) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
粘質沙雷氏菌Sheep TIMP-1 (Tissue Inhibitors of Metalloproteinase 1) ELISA Kit拉丁屬名: marcescens
大腸埃希氏桿菌Sheep PDGF-AB (Platelet Derived Growth Factor AB) ELISA Kit 拉丁屬名: Escherichia coli
皺紋單胞菌Sheep HCCS (Holocytochrome C Synthase) ELISA Kit 拉丁屬名: Rugamonas rubra
基利恩帚枝霉Sheep COL14 (Collagen Type XIV) ELISA Kit拉丁屬名: Sarocladium kiliense
釀酒酵母Sheep βTG/PBP/CXCL7/NAP2 (Thromboglobulin, Beta) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces Cerevisiae
Bacillus methylotrophicusSheep HO1 (Heme Oxygenase 1) ELISA Kit 用途: 拮抗菌
矩圓黑盤孢Sheep GAL14 (Galectin 14 ) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
布氏錐尾線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 大鼠粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor,GM-CSF ELISA Kit進口/原裝
大鼠淋巴細胞功能相關抗原3(LFA-3/CD58)ELISA試劑盒英文名稱:Rat lymphocyte function associated antigen 3,LFA-3 ELISA Kit 特價促銷
大鼠淋巴細胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)ELISA試劑盒英文名稱:Rat lymphotactin,Lptn/LTN ELISA Kit特價供應
大鼠淋巴細胞因子ELISA試劑盒英文名稱:Rat lymphocyte factor ELISA Kit進口/原裝
GM-CSF(Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factors) 粒細胞-巨噬細胞克隆刺激因子抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg
MME CD10 / Neprilysin / MME 鼠單抗 (PE) Human
Rhesus antibody Rh Phospho-Cyclin B1(Ser126) 磷酸化周期素B1 規格 0.1ml
CCDC51 英文名稱: 卷曲螺旋結構域蛋白51 0.2ml
Anti-FOXO3A 叉頭蛋白O3AMulti-class antibodies規格: 0.2ml
PI3K 大鼠磷脂酰肌醇激酶Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-EPEC/E.coli 腸致病性大腸桿菌Multi-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh mucin 5B/Muc5B 粘蛋白-5B 規格 0.2ml
PF-3(Human platelet factor 3) ELISA Kit 人血小板因子3 96T
SIM2 英文名稱: 轉錄因子蛋白SIM2 0.2ml
ADCY1 英文名稱: 腺苷酸環化酶1 0.2ml
Anti-CBFA1/RUNX2/FITC 熒光素標記成骨特異性轉錄因子IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
NT-4(Mouse Neurotrophin 4) ELISA kit 小鼠神經生長因子4Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-CD4/FITC 熒光素標記CD4蛋白IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh EB2/End binding protein 2 微管相關末端結合蛋白2 規格 0.2ml
Mouse Cluster of differentiation 19,CD19 ELISA Kit 小鼠CD19分子 96T
MYST1 英文名稱: 組蛋白乙酰轉移酶MOF 0.2ml
COMMD10 英文名稱: 銅代謝結構域蛋白10 0.2ml
Anti-PGRN 顆粒蛋白前體Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Cox V-IgM(Human Coxsackie virus IgM) ELISA Kit 人柯薩奇病毒IgMMulti-class antibodies規格: 48T
Anti-KLK3 激肽釋放酶3/舒素3Multi-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh LAMP2/CD107B 溶酶體相關膜蛋白2 規格 0.1ml
ANG- II ELISA Kit 大鼠緊張素Ⅱ 96T
Perilipin A+B 英文名稱: 脂滴包被蛋白A+B 0.2ml