- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
- 貨號:LZR4113
- 價格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-20
- 更新日期: 2025-01-10
產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號 | LZR4113 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
馬鏈球菌馬亞種探針法熒光定量PCR試劑盒 | Streptococcus equi subspecies equi | LZR4113 |
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
蘇云金芽胞桿菌MT3 (Metallothionein 3) ELISA Kit 用途: 用于抗蟲基因的分離和抗蟲相關基礎研究。
海洋交替赤桿菌C4b (Complement Component 4b) ELISA Kit拉丁屬名: Altererythrobacter marinus
假單胞菌GAD-Ab (Anti-Glutamic Acid Decarboxylase antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas extremaustralis
蘋果殼囊孢LCN1 (Lipocalin 1) ELISA Kit用途: 代謝產(chǎn)物
枯草芽孢桿菌ATF7 (Activating Transcription Factor 7) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
釀酒酵母PI3K2α (Phosphoinositide-3-Kinase Class-2-Alpha Polypeptide) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
薛瓦酵母GJβ1 (Gap Junction Protein Beta 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces chevalieri
釀酒酵母CYFRA21-1 (Cytokeratin Fragment Antigen 21-1) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
大豆慢生根瘤菌GH (Growth Hormone) ELISA Kit用途: 與大豆共生固氮,培養(yǎng)基pH4.2生長
尖鐮孢RETN (Resistin) ELISA Kit 用途: 教學科研
擬青霉HP (Haptoglobin) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
芽孢桿菌屬SSTR1 (Somatostatin Receptor 1) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus sp.
模擬乳粉蠟樣芽胞桿菌質(zhì)控樣品(定量)IL-17 (Interleukin 17) ELISA Kit拉丁屬名: 模擬乳粉蠟樣芽胞桿菌質(zhì)控樣品(定量)
側耳FGF21(Fibroblast Growth Factor 21) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
黃綠木霉MSP (Macrophage Stimulating Protein) ELISA Kit用途: 教學科研
馬鏈球菌馬亞種探針法熒光定量PCR試劑盒 豬可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA試劑盒 英文名稱:Porcine soluble E-selectin,sE-selectin ELISA Kit特價促銷
TRA16 (Testicular orphan nuclear receptor-4 (TR4)-associated protein) 激素受體相關蛋白/孤兒素受體相關蛋白(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-Calponin 1 鈣調(diào)節(jié)蛋白-1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh PDGFC/VEGF E 血小板源性生長因子C 規(guī)格 0.2ml
Apaf-1 濃縮液 0.1ml 進口分裝
TPH 英文名稱: 色酸羥化酶 0.1ml
CMV(1F11) 英文名稱: 人巨細胞病毒單克隆 0.1ml
CCDC148 英文名稱: 卷曲螺旋結構域蛋白148 0.2ml
Anti-Phospho-SEK1/MKK4 (Thr261) 磷酸化原活化蛋白激酶激酶4Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
KLK 6(Human Kallikrein 6) ELISA Kit 人激肽釋放酶6Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Notch1/MOTC 跨膜受體蛋白Notch-1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh IKB zeta/MAIL protein KB抑制蛋白激酶Ζ 規(guī)格 0.2ml
IL-13 ELISA KIT 大鼠白介素13 96T
phospho-PTPN6(Tyr536) 英文名稱: 磷酸化蛋白酪酸磷酸酶1C 0.1ml
XIAP相關因子1 anti-XAF1 0.2ml
Anti-TSLP/FITC 熒光素標記淋巴細胞生成素-1IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-IKK beta(S474) 磷酸化KB抑制蛋白激酶β 規(guī)格 0.1ml
active Caspase 3(caspase-3 p12 subunit) 活化半胱胺酸蛋白酶蛋白-3抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
禽腦脊髓炎(AE)ELISA試劑盒英文名稱:Avian encephalomyelitis,AE ELISA Kit進口/分裝
人1,25二羥基維生素D3(1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD 3)ELISA試劑盒英文名稱:Human 1,25-dihydroxyvitamin D3,DVD/DHVD 3 ELISA Kit進口/分裝
人1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)ELISA試劑盒英文名稱:Human 1,3-βD glucosidase,1,3-βD-Glu ELISA Kit特價促銷
CNPase 英文名稱: C型鈉尿肽 0.1ml
Anti-IGFBP3 樣生長因子結合蛋白3Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
ProGRP(Human pro-gastrin-releasing peptide) ELISA Kit 人胃泌素釋放肽前體Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Syndecan-2 多配體蛋白聚糖2Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh MARCH3 膜相關環(huán)指蛋白3 規(guī)格 0.2ml
PDXP(Human pyridoxal/pyridoxine vitamin B6-phosphatase) ELISA Kit 人吡哆醛/吡哆醇維生素B6磷酸酶 96T
RNF36 英文名稱: 環(huán)指蛋白36 0.2ml