- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào):LZR4072
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-19
- 更新日期: 2025-01-10
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號(hào) | LZR4072 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
羊血吸蟲探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商 | Schistosoma mattheei, | LZR4072 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
榛色青霉COL17 (Collagen Type XVII) ELISA Kit拉丁屬名: Hamigera avellanea
絲蘭輪紋斑菌PRSS23 (Protease, Serine 23) ELISA Kit 用途: 植物病原物,為該病防治提供依據(jù)
塊鱗灰毒傘VDR (Vitamin D Receptor) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
金黃色葡萄球菌MMSAM (Melanoma Metastasis Surface Adhesion Molecule) ELISA Kit 拉丁屬名: Staphylococcus aureus
*灰葡萄孢ERCC1 (Excision Repair Cross Complementing Rodent Repair Deficiency Complementation 1) ELISA Kit拉丁屬名: Botrytis cinerea Pers.
產(chǎn)單核細(xì)胞李氏桿菌FBLN4 (Fibulin 4) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
產(chǎn)氣莢膜梭菌 毒素E型C/EBPδ (CCAAT/Enhancer Binding Protein, Delta) ELISA Kit規(guī)格: 凍干物
多產(chǎn)色鏈霉菌ADCY2 (Adenylate Cyclase 2) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces polychromogenes
雙孢蘑菇(白蘑菇、洋蘑菇)TNNC2 (Troponin C Type 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Agaricus bisporus (Lange) Singer
新月彎孢FGFR2 (Fibroblast Growth Factor Receptor 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Curvularia lunata
博斯氏菌屬NUP160 (Nucleoporin 160kDa) ELISA Kit拉丁屬名: Bosea lathyri
茶藨子葡萄座腔菌ERK1 (Extracellular Signal Regulated Kinase 1) ELISA Kit用途: 用于該菌種群遺傳學(xué)研究及與蘋果輪紋、干腐、楊梅和石榴流膠、獼猴桃腐爛等病菌系統(tǒng)學(xué)研究
擬可可毛球二孢CYSLTR2 (Cysteinyl Leukotriene Receptor 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Lasiodiplodia pseudotheobromae
嗜糖土地芽孢桿菌Ly6a (Lymphocyte Antigen 6 Complex Locus A) ELISA Kit拉丁屬名: Terribacillus saccharophilus
乳桿菌屬CENPE (Centromere Protein E) ELISA Kit 拉丁屬名: Lactobacillus sp.
羊血吸蟲探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商小鼠樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Insulin-like growth factor 1,IGF-1 ELISA Kit 進(jìn)口/分裝
Testosterone 人睪酮Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Connexin-45 間隙連接蛋白45Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh NHE1/APNH1 鈉氫通道蛋白 規(guī)格 0.2ml
Human scavenger receptor B,SRB ELISA Kit 人清道夫受體B 96T
Transglutaminase 英文名稱: 谷酰胺轉(zhuǎn)胺酶1 0.1ml
CHMP6 英文名稱: 染色質(zhì)修飾蛋白CHMP6 0.1ml
Cathepsin D 英文名稱: 組織蛋白酶D 0.1ml
Anti-IGFBP1 樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
B7-2/sCD86(Human soluble Cluster of differentiation 86) ELISA Kit 人可溶性CD86Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-GCN2 蛋白激酶GCN2蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Mouse Anti-human IgG(3D3)/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的鼠抗人IgG單克隆 規(guī)格 0.1ml
ADAMTS4(Human ADAM metallopeptidase with thrombospondin type 1 motif4) ELISA Kit 人ADAM金屬肽酶含血小板反應(yīng)蛋白1基元4 96T
Phospho-RIP2 (Ser176) 英文名稱: 磷酸化受體結(jié)合絲酸蘇酸激酶2 0.1ml
雞可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA試劑盒英文名稱:Chicken Soluble Intercellular Adhesion Molecule-1,sICAM-1 ELISA Kit 進(jìn)口/原裝
雞可溶性內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒英文名稱:Chicken soluble endothelial protein C receptor,sEPCR ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
雞IgG(JE IgG)ELISA試劑盒英文名稱:Chicken Japanese Encephalitis IgG,JE IgG ELISA Kit 進(jìn)口/原裝
雞卵黃免疫球蛋白(IgY)ELISA試劑盒英文名稱:Hen egg Immunoglobulin of Yolk,IgY ELISA Kit進(jìn)口/分裝
IGFBP-2 (Insulin-like Growth Factor Binding Protein 2) 樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-2(多肽)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-AHA3 AHA3(擬南芥)Multi-class antibodies規(guī)格: 1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-CEBP alpha (Ser21) 磷酸化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP α 規(guī)格 0.1ml
CLIC1 英文名稱: 氯離子通道蛋白27 0.1ml
Anti-GTSE-1 G2期/S期應(yīng)答相關(guān)蛋白1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Human Pancreatic carcinoma markers-CA242 ELISA Kit 人標(biāo)志物CA242Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-HOXB4 HOXB4Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh MCP1/CCL2 單核細(xì)胞趨化蛋白1 規(guī)格 0.1ml
BACE1(Human Beta-site APP-Cleaving Enzyme 1) ELISA kit 人β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1 96T
ROBLD3 英文名稱: 胞內(nèi)接頭蛋白P14 0.1ml