- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào):LZR4066
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-19
- 更新日期: 2025-01-10
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號(hào) | LZR4066 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
疥螨通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒規(guī)格 | Sarcoptidae ssp. | LZR4066 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn);
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶(hù)只需提供樣品和待檢測(cè)名稱(chēng)即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品:
美澳型核果褐腐病菌HCCS (Holocytochrome C Synthase) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
豬絲菌CA3 (Carbonic Anhydrase III, Muscle Specific) ELISA Kit拉丁屬名: rhuriopathiae
雅致栓孔菌MCP-3 (Monocyte Chemotactic Protein 3) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
東方伊薩酵母CTAGE (Cutaneous T-Cell Lymphocyte Associated Antigen) ELISA Kit拉丁屬名: Issatchenkia orientalis
白淺灰鏈霉菌CFP (Complement Factor P) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces albogriseolus
納瓦河部落奇異球菌CDK6 (Cyclin Dependent Kinase 6) ELISA Kit拉丁屬名: Deinococcus navajonensis
綠色鏈霉菌IgA1 (Immunoglobulin A1) ELISA Kit 用途: 代謝產(chǎn)物具有活性。
小孔異擔(dān)子菌ANG (Angiostatin) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
洛格酵母PLA2G12B (Phospholipase A2, Group XII B) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces logos
黑曲霉DPYD (Dihydropyrimidine Dehydrogenase) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus niger
貝倫格勒座腔菌梨專(zhuān)化型EED (Embryonic Ectoderm Development) ELISA Kit 用途: 植物病原物;用于Botryosphaeria系統(tǒng)學(xué)研究。
海南吉爾霉REN (Renin) ELISA Kit用途: 飼料用酶的篩選
pLCDH-ciRFSCN (Fascin) ELISA Kit拉丁屬名: 宿主:DH5α,BL21
甜芝(靈芝屬之一種)ApoB100 (Apolipoprotein B100) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
谷氨酸棒桿菌Ⅲ型MYH9 (Myosin Heavy Chain 9, Non Muscle) ELISA Kit拉丁屬名: Corynebacterium glutamicum
疥螨通用探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒規(guī)格ZBTB3 英文名稱(chēng): 鋅指蛋白ZBTB3 0.2ml
DCTN1 英文名稱(chēng): 動(dòng)力蛋白激活蛋白1 0.1ml
RHOA RhoA 兔單抗 (FITC) Human
EPDR1 英文名稱(chēng): 哺乳動(dòng)物室管膜相關(guān)蛋白1 0.2ml
谷氨酸受體2D Anti-NR2D/NMDAR2D 0.2ml
Anti-SLC39A6/FITC 熒光素標(biāo)記SLC39A6IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-p38 MAPK/MAPK14(Thr180/Tyr182) 磷酸化原活化蛋白激酶p38 規(guī)格 0.1ml
CASPR 英文名稱(chēng): 軸突蛋白4/少突膠質(zhì)細(xì)胞 0.2ml
Anti-ET-1 內(nèi)皮素-1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
CTLA-4 大鼠細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原4Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Endo G 核酸內(nèi)切酶GMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh MUSK 肌肉骨骼受體酪氨酸激酶 規(guī)格 0.1ml
PAC3(Human platelet-associated Complement 3) ELISA Kit 人血小板相關(guān)補(bǔ)體3 96T
SEMA4D 英文名稱(chēng): 跨膜蛋白SEMA4D 0.2ml
C1orf114 英文名稱(chēng): 1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框114 0.2ml
Anti-Claudin 1 緊密連接蛋白1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
小鼠幽門(mén)螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA試劑盒 英文名稱(chēng):Mouse Helicobacter pylori IgG,Hp-IgG ELISA Kit進(jìn)口/分裝
小鼠游離睪酮(F-TESTO)ELISA試劑盒英文名稱(chēng):Mouse Free Testoterone,F-TESTO ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
小鼠游離甲狀腺素(FT4)ELISA試劑盒英文名稱(chēng):Mouse Free Thyroxine,FT4 ELISA Kit進(jìn)口/原裝
小鼠游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒英文名稱(chēng):Mouse Free Tri-iodothyronine Indes,Free-T3 ELISA Kit特價(jià)促銷(xiāo)
小鼠游離脂肪酸(FFA)ELISA試劑盒英文名稱(chēng):Mouse free fatty acids,FFA ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
CLCN3 英文名稱(chēng): 氯離子通道蛋白3 0.2ml
Anti-IL-20RB/IL-20R2 白介素20受體β鏈Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
NAIP(Human neuronal apoptosis inhibitory protein) ELISA Kit 人神經(jīng)元凋亡抑制蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Influenza A Virus Hemagglutinin 甲型病毒血凝素Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh MMP-1 基質(zhì)金屬蛋白酶-1 規(guī)格 0.1ml
PKB(Human protein kinase B) ELISA Kit 人蛋白激酶B 96T
phospho-RGS19(Ser151) 英文名稱(chēng): 磷酸化G蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子19 0.1ml