- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號:LZR4045
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-19
- 更新日期: 2025-01-10
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號 | LZR4045 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
沙門氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒 | Salmonella enteritidis | LZR4045 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
燕麥鐮孢SCFR/c-Kit (Stem Cell Factor Receptor) ELISA Kit 拉丁屬名: Fusarium avenaceum
草酸青霉CSF3/GCSF (Granulocyte Colony Stimulating Factor 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Penicillium oxalicum
嗜熱鏈球菌BNP (Brain Natriuretic Peptide) ELISA Kit拉丁屬名: Streptococcus thermophilus
蘇云金芽孢桿菌UCRP (Ubiquitin Cross Reactive Protein) ELISA Kit用途: 害蟲生物防治
耐冷冷桿菌GRα (Glucocorticoid Receptor Alpha) ELISA Kit拉丁屬名: Cryobacterium psychrotolerans
大馬勃C8b (Complement Component 8b) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
巨型艾美耳球蟲PHSA (Poly Serium Antigen) ELISA Kit拉丁屬名: maxima
玫瑰單胞菌AR (Androgen Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Roseomonas thermophilum sp. nov.
鐮刀菌(大豆根腐病菌)RANκL (Receptor Activator of Nuclear Factor Kappa B Ligand) ELISA Kit用途: 大豆根腐病的防治研究
蛹蟲草TSA (Thyroid Stimulating Antibody) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
乳桿菌屬TPP (Thrombus Precursor Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus sp.
pAAV-RC5CASP12 (Caspase 12) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
豬鏈球菌OBTF1 (Octamer Binding Transcription Factor 1) ELISA Kit 拉丁屬名: suis
布魯氏菌CCSA-2 (Colon Cancer Specific Antigen-2) ELISA Kit拉丁屬名: abortus
產(chǎn)酸克雷伯氏菌TSPAN30 (Tetraspanin 30) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
沙門氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒 Anti-Bim 細(xì)胞死亡調(diào)解子Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Dishevelled 2 英文名稱: 蓬亂蛋白2 0.2ml
水通道蛋白-5 Anti-AQP5 0.1ml
Anti-CEA/Gold 膠體金離子標(biāo)記鼠抗人癌胚抗原單克隆(檢測)IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-ELk1(Ser383) 磷酸化細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子ELK1 規(guī)格 0.1ml
E2F6 轉(zhuǎn)錄因子E2F-6抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
人類似RIKEN cDNA 3110050K21 基因 ELISA試劑盒英文名稱:human similar to RIKEN cDNA 3110050K21 gene ELISA Kit進(jìn)口/分裝
CASKIN2 英文名稱: 皮膚相互作用蛋白2 0.1ml
Anti-KCNA7 鉀電壓閥門通道混合器相關(guān)亞家族成員7Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
LTB(Human heat-labile enterotoxin B subunit) ELISA Kit 人不耐熱腸毒素B亞單位Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-JNK1/3 氨基末端激酶1/3Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh LCE2B 晚期包膜蛋白2B 規(guī)格 0.2ml
DHT(Human Dihydrotestosterone) ELISA Kit 人雙氫睪酮 96T
PSMD6 英文名稱: 蛋白酶調(diào)解因子10 0.2ml
人堿性成纖維細(xì)胞生長因子4(bFGF-4)ELISA試劑盒英文名稱:Human basic fibroblast growth factor 4,bFGF-4 ELISA Kit 特價(jià)促銷
Integrin Beta5 整合素β5抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5ml
Anti-Adiponectin Receptor 1 脂聯(lián)素受體-1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-cdc25A (Ser178) 磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白25 規(guī)格 0.1ml
甲基綠染色液-綠色 12ml 配合DAB,New Fuchsin,F(xiàn)uchsin使用
VAT 英文名稱: 囊泡乙酰膽堿通道 0.1ml
DUSP5 英文名稱: 雙特異性蛋白磷酸酶5 0.2ml
CKS1 英文名稱: 細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶調(diào)節(jié)亞基1 0.2ml
Anti-CXCR5/CD185 細(xì)胞表面趨化因子受體5Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
PR3 Ab-IgG(Human Anti-proteinase 3 antibody IgG) ELISA Kit 人抗蛋白酶3IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Insulin Receptor Beta 胰島素受體βMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Livin 凋亡抑制蛋白 規(guī)格 0.1ml
CH(Human cholesterol) ELISA Kit 人血清總膽固醇 96T
RAG2 英文名稱: 重組激活基因2蛋白 0.2ml