- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
- 貨號:LZR4043
- 價格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-19
- 更新日期: 2025-01-10
產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號 | LZR4043 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
都柏林沙門氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | Salmonella dublin | LZR4043 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
白布勒擔(dān)孢酵母ACO1 (Aconitase 1) ELISA Kit拉丁屬名: Bulleromyces albus
寡養(yǎng)單胞菌BALP (Bone Alkaline Phosphatase) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
印度洋新鞘氨菌FLRT2 (Fibronectin Leucine Rich Transmembrane Protein 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Novosphingobium indicum
粉褶側(cè)耳、粉紅側(cè)耳Anti-MPO (Anti-Myeloperoxidase Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Pleurotus rhodophyllus Bres.
果生鏈核盤菌ApoF (Apolipoprotein F) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
殼菌TPO (Thyroid Peroxidase) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
琉球曲霉FcγR II/CD32 (Receptor II for the Fc Fragment of IgG) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus luchuensis
酮叢毛單胞菌TAP (Trypsinogen Activation Peptide) ELISA Kit拉丁屬名: Comamonas testosteroni
展示接霉sFMC (Soluble Fibrin Monomer Complex) ELISA Kit拉丁屬名: Zygorhynchus exponens
解脂亞羅酵母SOCS3 (Suppressors of Cytokine Signaling 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Yarrowia lipolytica
柿生假絲酵母EphA2 (Tyrosine protein kinase receptor A2) ELISA Kit拉丁屬名: Candida diospyri
解淀粉芽孢桿菌解淀粉亞種F7 (Coagulation Factor Ⅶ) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus amyloliquefaciens subsp. amyloliquefaciens
木霉MX1 (Myxovirus Resistance 1) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
美澳型核果褐腐病菌ApoE (Apolipoprotein E) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
酵母屬ES-Ab (Anti-Endostatin Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces sp.
都柏林沙門氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書beta Glucan Receptor 英文名稱: β葡聚糖受體 0.1ml
Anti-Slug 鋅指轉(zhuǎn)錄因子SlugMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
ATR ELISA Kit 大鼠抗凝血酶受體Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-WNT9A 信號通路Wnt9aMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh GABA Transporter 1/GAT-1 γ氨基丁酸運載蛋白1 規(guī)格 0.1ml
G-CSF(Human Granulocyte Colony Stimulating Factor) ELISA Kit 人粒細胞集落刺激因子 96T
NAT8B 英文名稱: N-乙酰轉(zhuǎn)移酶8B 0.2ml
Casein kinase 1 gamma 2 英文名稱: 酪蛋白激酶1γ2/casein kinase Iγ1 0.2ml
Anti-PACAP R1/VIP receptor-I 腺苷酸環(huán)化酶激活肽受體-IMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
NA(Human Noradrenaline) ELISA Kit 人去甲腎上腺素Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Lpin1 protein Lpin1 Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh KLH 血藍蛋白 規(guī)格 0.1ml
LH ELISA Kit 大鼠促黃體激素 96T
PGRPS 英文名稱: 肽聚糖識別蛋白1 0.1ml
phospho-BCAR1(Tyr165) 英文名稱: 磷酸化癌抗雌激素耐藥蛋白1 0.1ml
Anti-S100A13 S100A13Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Human Leukemia inhibitory factor,LIF ELISA kit 人抑制因子Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-SCN1A SCN1AMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh GRAMD2 GRAM結(jié)構(gòu)域蛋白2 規(guī)格 0.2ml
Cr ELISA Kit 大鼠骨膠原交聯(lián) 96T
Osteocalcin 英文名稱: 骨鈣蛋白/骨鈣素 0.1ml
CKMT 英文名稱: 酸性線粒體肌酸激酶 0.1ml
Anti-LPL/PLASTIN2 脂蛋白脂酶Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Alpha-bungarotoxin, Alpha-BGT ELISA Kit α-銀環(huán)蛇毒素Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Phospho-p56Dok2(Tyr351)/FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化D酪氨酸激酶衰減蛋白2IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh CXorf56 X染色體開放閱讀框56 規(guī)格 0.2ml
PRRSV M protein 豬藍耳病病毒M蛋白 0.5mg
phospho-Kv4.2(Thr607) 英文名稱: 磷酸化電壓門控性鉀通道蛋白Kv4.2 0.1ml