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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
科恩酒曲菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號:LZR4027
  • 價(jià)格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-19
  • 更新日期: 2025-01-10
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號 LZR4027
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號
是否進(jìn)口

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

科恩酒曲菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

Rhizopus cohnii

LZR4027

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

食砜節(jié)桿菌DHEA-S7 (Dehydroepiandrosterone S7) ELISA Kit拉丁屬名: Arthrobacter sulfonivorans

芭蕉生粘鞭霉MS (Melatonin Sulfate) ELISA Kit拉丁屬名: Gliomastix musicola

多毛棒桿菌IgA (Immumoglobulin A) ELISA Kit 拉丁屬名: Corynebacterium pilosum

新月彎孢PF4 (Platelet Factor 4) ELISA Kit 用途: 研究

異常畢赤酵母fMet (Formylmethionine) ELISA Kit拉丁屬名: Pichia  anomala

天藍(lán)微紅鏈霉菌ANG I R-Ab (Angiotensin I Receptor Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces coeruleorubidus

枯草芽孢桿菌ARRβ1 (Arrestin Beta 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis

孢囊放線菌MOG (Myelin Oligodendrocyte Glycoprotein) ELISA Kit用途: 代謝產(chǎn)物具有抗菌活性。

西唐氏鏈霉菌ALD (Aldolase) ELISA Kit用途: 產(chǎn)生代謝產(chǎn)物具有抑菌活性

棲熱菌FETUB (Fetuin B) ELISA Kit拉丁屬名: Thermus  sp.

大腸桿菌GTF2A1 (General Transcription Factor IIA, Polypeptide 1) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

山東戈登氏菌PGRP-S (Peptidoglycan Recognition Protein-S) ELISA Kit拉丁屬名: Gordonia shandongensis

馬爾他布魯氏菌MBP/MBL (Mannose Binding Protein/Mannose Binding Lectin) ELISA Kit規(guī)格: 凍干物

黎巴嫩鏈霉菌黎巴嫩亞種PDGFB (Platelet Derived Growth Factor Subunit B) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces libani subsp.libani

枯草芽孢桿菌GnRH (Gonadotropin Releasing Hormone) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
科恩酒曲菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書ATP4B 英文名稱: 氫鉀ATP酶通道蛋白 0.1ml

Anti-Tenascin C (C terminal) 細(xì)胞粘合素(C端)腱糖蛋白-C(固生蛋白)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Collagenase II ELISA Kit 大鼠膠原酶IIMulti-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-Tenascin C/Tn-C 細(xì)胞粘合素(固生蛋白)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh GluR1/AMPA 谷氨酸受體1 規(guī)格 0.1ml

Pro-ANP(Mouse Pro Atrial Natriuretic Peptide) ELISA Kit 小鼠前心鈉肽 96T

NDUFV1 英文名稱: NADH脫氫酶黃素蛋白1 0.2ml

CARD10 英文名稱: BCL10結(jié)合蛋白和激活核轉(zhuǎn)錄因子 0.2ml

Anti-IL-2 白介素2(大、小鼠)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

RNP-Ab(Human anti-ribonucleo protein Antibody) ELISA Kit 人抗核糖核蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-IL-33/NFHEV 白介素33Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh LRP6 受體相關(guān)蛋白6 規(guī)格 0.2ml

cath-K(Human Cathepsin K) ELISA Kit 人組織蛋白酶K 96T

phospho-c-Raf(Ser339) 英文名稱: 磷酸化原癌基因c-Raf 0.1ml

CG6856-PA peptide CG6856-PA抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

鮭魚補(bǔ)體蛋白4(C4)ELISA試劑盒英文名稱:C4 ELISA Kit 特價(jià)供應(yīng)

鮭魚降鈣素(SCT)ELISA試劑盒英文名稱:Salmon calcitonin,SCT ELISA Kit進(jìn)口/分裝

規(guī)格:2*96孔荷蘭賽迪0型2板ELISA試劑盒英文名稱:Elisa進(jìn)口/原裝

紅螯光殼螯蝦卵黃脂磷蛋白/卵黃磷蛋白(Lv/Vn)ELISA試劑盒英文名稱:Cherax quadricarinatus lipovitellin/vitellin,Lv/Vn ELISA Kit 進(jìn)口/原裝

Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒英文名稱:Monkey N-terminal procollagen Ⅲ propeptide,PⅢNP ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)

human IFN- Alpha (Interferon Alpha ) 干擾素-α抗原(人)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

CK7 英文名稱: 細(xì)胞角蛋白7 0.1ml

Anti-phospho-IKK alpha (Thr23) 磷酸化KB抑制蛋白激酶αMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

SDA(Human salivary duct autoantibody) ELISA Kit 人抗唾液腺導(dǎo)管組織Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-Inhibin Alpha 抑制素αMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh l-Myc Myc基因相關(guān)蛋白 規(guī)格 0.1ml

cytb561(Human lipocalin 2) ELISA Kit 人細(xì)胞色素b561 96T

RPRD1A 英文名稱: 細(xì)胞周期依賴性激酶抑制相關(guān)蛋白 0.2ml

 


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