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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
鼻鳥桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒
  • 品牌:聯祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:LZR3913
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-18
  • 更新日期: 2025-01-10
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 聯祖
貨號 LZR3913
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產品名稱

英文名稱

貨號

鼻鳥桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒

Ornithobacterium rhinotracheale

LZR3913

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產品:

鏈霉菌PDGFA (Platelet Derived Growth Factor Subunit A ) ELISA Kit 用途: 代謝產物具有抗菌活性。

煙色離褶傘MCSP (Melanoma Associated Chondroitin Sulfate Proteoglycan) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

白被黑蛋巢PP13 (Placental Protein13) ELISA Kit拉丁屬名: Cyathus pallidus

芽孢桿菌TNF-α (Tumor Necrosis Factor Alpha) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus atrophaeus

柯氏黑蛋巢IgE (Immunoglobulin E) ELISA Kit拉丁屬名: Cyathus colensoi

棒曲霉SGK2 (Serum/Glucocorticoid Regulated Kinase 2) ELISA Kit用途: 產青霉素

大腸埃希菌NFRκB (Nuclear Factor Related To Kappa B Binding Protein) ELISA Kit拉丁屬名: coli

尖孢鐮刀菌GKRP (Glucokinase Regulatory Protein) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

釀酒酵母EG-VEGF/PK1 (Endocrine Gland Derived Vascular Endothelial Growth Factor)ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

pBBRMCS-2iPLA2 (Phospholipidase A2, Calcium Independent) ELISA Kit規格: 1ml甘油管1支,20ul質粒,一般次日下午

動物雙歧桿菌IL-2 (Interleukin 2) ELISA Kit拉丁屬名: Bifidobacterium  animalis

華美鏈霉菌GP (Anti-Glycoprotein Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces  splendens

芽孢桿菌MIgD (Membrane IgD) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus sp.

立枯絲核菌(測序正確)IL-4 (Interleukin 4) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizoctonia solani

絨毛栓菌PRSS8 (Protease, Serine 8) ELISA Kit 拉丁屬名: Trametes pubescens
鼻鳥桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒 人緊張素Ⅱ受體1(ANGⅡR-1)ELISA試劑盒英文名稱:Human angiotension Ⅱ receptor 1,ANGⅡR-1 ELISA Kit特價供應

人緊張素Ⅱ受體1(ATⅡR1)ELISA試劑盒 英文名稱:Human angiotension Ⅱ receptor 1 Antibody,ATⅡR1 Ab ELISA Kit 進口/原裝

人緊張素Ⅱ受體2(AT2R)ELISA試劑盒英文名稱:Human Angiotensin Ⅱ Receptor 2,AT2R ELISA Kit 特價促銷

人緊張素Ⅱ受體2(AT2R-Ab)ELISA試劑盒 英文名稱:Human Angiotensin Ⅱ Receptor 2 antibody,AT2R-Ab ELISA Kit進口/分裝

YKL-40/CGP-39 human 軟骨糖蛋白39(人)Multi-class antibodies規格: 96T

Anti-Phospho-DBC1 (Thr454) 磷酸化缺失基因1Multi-class antibodies規格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh Netrin 4 軸突生長誘向因子4 規格 0.1ml

C9orf40 英文名稱: 9號染色體開放閱讀框40 0.2ml

Anti-PLAU/uPA 尿激酶型纖溶酶原激活因子Multi-class antibodies規格: 0.2ml

sHLA-G(Human soluble human leucocyte antigen G1) ELISA Kit 人可溶性白細胞抗原GMulti-class antibodies規格: 48T

Anti-PRAS40/AKT1 substrate 1 蛋白激酶AKT底物1Multi-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh HDL/high density lipoprotein 規格 0.1ml

TG ELISA Kit 大鼠甲狀腺球蛋白 96T

PMS1 英文名稱: 錯配修復基因PMS1 0.1ml

Anti-TREML2/TLT2/FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠髓系細胞觸發受體樣轉錄因子2IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-IRF7 (Ser471/472) 磷酸化干擾素調節因子7 規格 0.1ml

Socs 1 (suppressor of cytokine signaling 1) 細胞激酶信號-1抑制劑(抗原)Multi-class antibodies規格: 0.5mg

2,3Dinor烷B2(2,3-dinor-TXB2)ELISA試劑盒英文名稱:Human 2,3-dinor thromboxane B2,2,3-dinor-TXB2 ELISA Kit特價供應

2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)ELISA試劑盒英文名稱:Human 2,3-Disphosphoglycerate,2,3-DPG ELISA Kit特價供應

25羥基維生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA試劑盒英文名稱:Human 25-Dihydroxy vitamin D3,HVD3 ELISA Kit進口/分裝

26S蛋白酶體(26S PSM)ELISA試劑盒 英文名稱:Human 26S proteasome,26S PSM ELISA Kit進口/分裝

Cezanne 英文名稱: Cezanne蛋白 0.1ml

Anti-HER2 receptor HER2受體Multi-class antibodies規格: 0.2ml

Human Coronaviruses IgG ELISA kit 人毒Multi-class antibodies規格: 48T

Anti-Phospho-Jak3 (Tyr980/981) 磷酸化蛋白酪氨酸激酶JAK-3Multi-class antibodies規格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh LCEAH/ECHS1 長鏈烯脂酰輔酶A水化酶 規格 0.1ml

GHRH(Human growth hormone releasing hormone) ELISA Kit 人促生長激素釋放激素 96T

RNF3 英文名稱: 環指蛋白3 0.2ml


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