產地 | 進口、國產 |
品牌 | 聯祖 |
貨號 | LZR4109 |
用途 | 公司產品僅用于科研 |
包裝規格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
念珠狀鏈桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒 | Streptobacillus moniliformis | LZR4109 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環步驟 | 溫度 | 時間 | 循環數 |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產品:
異配囊接霉PDIA5 (Protein Disulfide Isomerase A5) ELISA Kit拉丁屬名: Mucor heterogamus
嗜果刀孢FGF4 (Fibroblast Growth Factor 4) ELISA Kit 拉丁屬名: tigmina carpophila
扣囊復膜孢酵母EFNA1 (Ephrin A1) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomycopsis fibuligera
巨大芽孢桿菌CP (Ceruloplasmin) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus megaterium
黃褐牛肝菌GNβ1 (G Protein Beta 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Boletus subsplendidus W.F. Chiu
銅綠假單胞菌CABIN1 (Calcineurin Binding Protein 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudomonas aeruginosa
狹旋毛殼AP 17 (Apelin 17) ELISA Kit拉丁屬名: Chaetomium angustispirale
樟疫霉PKD1 (Protein Kinase D1) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
環形凸臍蠕孢GAD2 (Glutamate Decarboxylase 2) ELISA Kit 用途: 研究
人纖維單胞菌CYP1A2 (Cytochrome P450 1A2) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
產氣莢膜梭菌 毒素C型GFAP (Glial Fibrillary Acidic Protein) ELISA Kit 拉丁屬名: perfringens Type C
釀酒酵母ACAT2 (Acetyl Coenzyme A Acetyltransferase 2) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
鹽反硝化枝芽孢桿菌 IGFBP-2 (Insulin Like Growth Factor Binding Protein 2) ELISA Kit拉丁屬名: Virgibacillus halodenitrificans
大腸桿菌SYNPO (Synaptopodin) ELISA Kit 用途: 獲得來源于Thermus菌屬的耐高溫酶類用于科學研究及功能檢測
雷丸*BCL2L1/BCL-X (Bcl-2 Like Protein 1) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
念珠狀鏈桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒 AADACL4 英文名稱: 芳香乙酰胺脫乙酰基酶樣蛋白4 0.2ml
Anti-A/H1N1-M2 Human/Gold 膠體金標記兔抗人A型病毒H1N1-M2IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
IL-7(Mouse Interleukin-7) ELISA kit 小鼠白介素7Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-Caspase-6 (NT)/FITC 熒光素標記半胱胺酸蛋白酶蛋白-6(N端)IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ELOVL6 長鏈脂肪酸延長酶長ELOVL6 規格 0.2ml
phytohaemagglutinin,PHA ELISA Kit 植物血凝素 96T
METTL11A 英文名稱: 甲基化樣蛋白11(N端) 0.1ml
CCDC138 英文名稱: 卷曲螺旋結構域蛋白138 0.2ml
Anti-KLF5 腸道內富含的Kruppel樣因子5Multi-class antibodies規格: 0.2ml
LP Ab-IgG(Human Legionella antibody IgG) ELISA Kit 人軍團菌IgGMulti-class antibodies規格: 48T
Anti-phospho-Kinesin 5B (Ser272) 磷酸化Kinesin 5BMulti-class antibodies規格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh LASS2 轉移抑制基因1 規格 0.2ml
CA(Human catecholamine) ELISA Kit 人兒茶酚胺 96T
P2Y8 英文名稱: G蛋白偶聯嘌呤受體p2y8 0.2ml
phospho-Desmin (Thr16) 英文名稱: 磷酸化結蛋白 0.1ml
Anti-ACEI 緊張素1轉換酶抑制劑Multi-class antibodies規格: 0.1ml
ESYT1 英文名稱: 延伸突觸蛋白1 0.2ml
軸索過度生長抑制因子-B Anti-Nogo-B 0.2ml
Anti-Phospho-SirT1 (Ser47) /FITC 熒光素標記磷酸化沉默調節蛋白1IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-P53(Thr18) 磷酸化抑制基因P53 規格 0.1ml
Bax peptide Bax(多肽抗原)Multi-class antibodies規格: 0.5mg
CNN2 英文名稱: 平滑肌鈣調蛋白CNN2 0.2ml
Anti-IL-8/CXCL8 (mouse, rat) 白介素8 (小鼠,大鼠)Multi-class antibodies規格: 0.1ml
LN 人層粘連蛋白Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-CK II alpha/STK 屬絲/蘇氨酸蛋白質激酶Multi-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh NT/NTS1/NTRH 神經降壓素 規格 0.1ml
Plasmid Minipreparation Kit 質粒小提試劑盒 100次(100個硅膠柱和試劑)
RNF125 英文名稱: 環指蛋白125 0.2ml