- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
- 貨號:LZR4091
- 價格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-19
- 更新日期: 2025-01-10
產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號 | LZR4091 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
葡萄狀穗霉屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | Stachybotrys spp. | LZR4091 |
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
梭形凸臍蠕孢PKIα (Protein Kinase Inhibitor Alpha) ELISA Kit 用途: 研究
炭黑曲霉C3 (Complement Component 3) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus carbonarius
粉肉擬層孔菌Ep-CAM/CD326 (Epithelial Cell Adhesion Molecule) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
大洋枝芽孢桿菌ANG1 (Angiopoietin 1) ELISA Kit拉丁屬名: Virgibacillus oceani
枯草芽孢桿菌F10 (Coagulation Factor X) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
尖孢鐮孢TPA (Tissue Polypeptide Antigen) ELISA Kit拉丁屬名: Fusarium oxysporum
茶輪斑盤多毛孢菌Alk-Smase (Alkaline Sphingomyelinase) ELISA Kit用途: 植物病原物,為該病防治提供依據(jù)
微球菌ANGPTL1 (Angiopoietin Like Protein 1) ELISA Kit拉丁屬名: Micrococcus sp.
柞蠶鏈球菌DDC (Dopamine Decarboxylase) ELISA Kit拉丁屬名: Streptococcus pernyi
釀酒酵母MRC1 (Mannose Receptor C Type 1 Like Protein 1) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
泡囊短波單胞菌CMLC-1 (Cardiac Myosin Light Chains 1) ELISA Kit用途: 分類、研究,具有用作耐重金屬基因資源潛力。
Enterobacter cloacae subsp. dissolvensC4 (Complement Component 4) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
LMP7/PSMB9 (Low Molecular-weight Protein/proteasome Beta-type Subunit) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
哈茨木霉GSTpi (Glutathione S Transferases Pi) ELISA Kit拉丁屬名: Trichoderma harzianum
灰黃青霉fT4 (Free Thyroxine) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium griseofulvum
葡萄狀穗霉屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒說明書DUOXA1 英文名稱: 雙氧化酶成熟因子 0.2ml
Anti-phospho-AMPK beta 1(Ser108) 磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
E2F6 英文名稱: 轉(zhuǎn)錄因子E2F6 0.1ml
上皮生長因子樣域酪氨酸激酶2 anti-Tie2 0.2ml
Anti-Tn-C/FITC 熒光素標記腱糖蛋白-CIgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-KLF5(Ser311) 磷酸化腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子5 規(guī)格 0.1ml
PACAP/VIP receptor 腺苷酸環(huán)化酶激活肽/活性腸肽受體(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
CCAP 英文名稱: 心動加速蛋白多肽 0.2ml
Anti-Integrin Alpha 3 + Beta 1 整合素α3β1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
BB-Ab(Human anti-B burgdorleri antibody) ELISA Kit 人抗BBMulti-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-IL-27R/TCCR 白細胞介素27受體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh LTBP4 轉(zhuǎn)化生長因子β結(jié)合蛋白4 規(guī)格 0.2ml
BSP(Human bone sialoprotein) ELISA Kit 人骨涎蛋白 96T
RAB5 英文名稱: ras癌基因家族Rab5蛋白 0.1ml
人類似RIKEN cDNA 2010109K09 基因 ELISA試劑盒英文名稱:human similar to RIKEN cDNA 2010109K09 gene ELISA Kit特價促銷
SIP1 peptide 運動神經(jīng)元存活蛋白結(jié)合蛋白1抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-Bim 細胞死亡調(diào)解子Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh PGGT1A/FNTA 蛋白香葉烯基轉(zhuǎn)移酶1α 規(guī)格 0.2ml
Flt-1/VEGFR1 濃縮液 0.1ml 進口分裝
Urocortin 3 英文名稱: 尿皮質(zhì)素UCN3 0.1ml
CCL24 英文名稱: 嗜酸粒細胞趨化蛋白24 0.2ml
CLSTN2 英文名稱: 相關(guān)類鈣粘蛋白CS2 0.2ml
Anti-phospho-IRS1(Ser789) 磷酸化受體底物-1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Lep IgG(Human Leptospira IgG) ELISA Kit 人鉤端螺旋體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-KCNA7 鉀電壓閥門通道混合器相關(guān)亞家族成員7Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Layilin 透明質(zhì)酸受體 規(guī)格 0.1ml
SS(Human Somatostatin) ELISA Kit 人生長抑素 96T
PSMD6 英文名稱: 蛋白酶調(diào)解因子6 0.2ml