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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
粘質(zhì)沙雷菌探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號:LZR4078
  • 價(jià)格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-19
  • 更新日期: 2025-01-10
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號 LZR4078
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號
是否進(jìn)口

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

粘質(zhì)沙雷菌探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格

Serratia marcescens

LZR4078

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時(shí)間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

地芽孢桿菌屬UGCG (UDP-glucose ceramide glucosyltransferase) ELISA Kit拉丁屬名: Geobacillus  sp.

棉毛狀嗜熱霉EFNA4 (Ephrin A4) ELISA Kit 拉丁屬名: Thermomyces lanuginosus

栗色針孔菌fFDFT1 (Farnesyl Diphosphate Farnesyltransferase 1) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

毛柄金錢菌(金針菇)ERβ (Estrogen Receptor Beta) ELISA Kit用途: 食用、藥用

不動(dòng)桿菌SIAE (Sialic Acid Acetylesterase) ELISA Kit拉丁屬名: Acinetobacter radioresistens

枯草芽孢桿菌CFTR (Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus  subtilis

白磷蘑菇MTF (Microtransferrin) ELISA Kit拉丁屬名: Agaricus bernardii Quél.

枯草芽孢桿菌CLDN14 (Claudin 14) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus  subtilis

釀酒酵母BAFF/CD257/TNFSF13B (B-Cell Activating Factor) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae

Microbacterium flavumSCT (Secretin) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

哈茨木霉PEX2 (Peroxisomal Biogenesis Factor 2) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

產(chǎn)紫青霉TNNI1 (Troponin I Type 1, Slow Skeletal) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium purpurogenum

腸膜明串珠菌IL-3 (Interleukin 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Leuconostoc  mesenteroides

歧異假絲酵母PYGL (Glycogen Phosphorylase, Liver) ELISA Kit 拉丁屬名: Candida  diversa

焦土鏈霉菌PLA2G10 (Phospholipase A2, Group X) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces showdoensis
粘質(zhì)沙雷菌探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格小鼠孕激素/孕酮(PROG)ELISA試劑盒 英文名稱:Mouse Progesterone,PROG ELISA Kit進(jìn)口/原裝

小鼠孕酮受體(PROGR)ELISA試劑盒 英文名稱:Rat Progesterone receptor,PROGR ELISA Kit特價(jià)促銷

小鼠載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse apoprotein,apo-A1 ELISA Kit進(jìn)口/原裝

小鼠載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse apoprotein B100,apo-B100 ELISA Kit特價(jià)促銷

小鼠載脂蛋白E(Apo-E)ELISA試劑盒 英文名稱:Mouse Apolipoprotein E,Apo-E ELISA Kit進(jìn)口/原裝

IL-8 白介素8(白細(xì)胞介素-8)(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

Anti-CD22/BLCAM B淋巴細(xì)胞粘附分子CD22Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Cathepsin Z 英文名稱: 組織蛋白酶z 0.1ml

Anti-IFI16/p16 γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

NTX(Human cross linked N-telopeptide of type I collagen) ELISA Kit 人Ⅰ型膠原N末端肽Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-HSP90 Alpha 熱休克蛋白90αMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh MARCH8 膜相關(guān)環(huán)指蛋白8 規(guī)格 0.2ml

KLK 1(Human Kallikrein 1) ELISA Kit 人激肽釋放酶1 96T

Phospho-Ret (Tyr905) 英文名稱: 磷酸化指狀蛋白R(shí)ET 0.1ml

ADM R 英文名稱: 腎上腺髓質(zhì)素受體 0.1ml

Anti-CD26/ADCP2/DPP IV /FITC 熒光素標(biāo)記CD26IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

PF3(Mouse platelet factor 3) ELISA Kit 小鼠血小板因子3Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-FLASH/CASP8AP2/FITC 熒光素標(biāo)記半胱氨酸蛋白酶8相關(guān)蛋白2IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh ELMO1 吞噬細(xì)胞運(yùn)動(dòng)蛋白1 規(guī)格 0.2ml

OSM (Rabbit Oncostatin-M) ELISA Kit 兔抑瘤素M 96T

MMP-26 英文名稱: 基質(zhì)金屬蛋白酶-26 0.2ml

CLK3 英文名稱: 細(xì)胞分裂周期樣激酶3 0.2ml

Anti-oxytocin receptor 催產(chǎn)素受體(縮宮素受體)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

Casp-3(Human Caspase 3) ELISA Kit 人胱天蛋白酶3Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-NRF-1 核呼吸因子-1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh IGC 非洲爪蟾IGC 規(guī)格 1ml

VK1 ELISA Kit 大鼠維生素K1 96T

PARL 英文名稱: 骨骼肌細(xì)胞線粒體膜蛋白PARL 0.2ml


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