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PCR反應鑒定——PCR反應條件:

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析，提供實驗報告給您。

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因，較佳地管家基因，優選地為RPPH1的擴增區域，其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

以下列是公司正在熱銷的產品：

枯草芽孢桿菌GSK3β (Glycogen Synthase Kinase 3 Beta) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus  subtilis

釀酒酵母Gas6 (Growth Arrest Specific Protein 6) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

匍匐曲霉COL7 (Collagen Type VII) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus repens

日本玉蕈IL-1R2 (Interleukin 1 Receptor Type II) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

枯斑擬盤多毛孢FGα (Fibrinogen Alpha) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

側柄褐孔菌TECK/CCL25 (Thymus Expressed Chemokine) ELISA Kit 拉丁屬名: Fuscoporia discipes

桃紅平菇PKB (Protein Kinase B) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

枯草芽孢桿菌UCHL1 (Ubiquitin Carboxyl Terminal Hydrolase L1) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis

莫哈韋芽孢桿菌LIFR (Leukemia Inhibitory Factor Receptor) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus mojavensis

釀酒酵母ANGPTL4 (Angiopoietin Like Protein 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

水叢毛單胞菌VMA (Vanillylmandelic Acid) ELISA Kit拉丁屬名: Comamonas aquatica

茯苓KIM-1 (Kidney Injury Molecule 1) ELISA Kit拉丁屬名: Wolfiporia  extensa

白淺灰鏈霉菌C4BP (C4 Binding Protein) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

殼菌MUC4 (Mucin 4) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

乳酸乳球菌乳亞種TIMP-2 (Tissue Inhibitors of Metalloproteinase 2) ELISA Kit拉丁屬名: Lactococcus  lactis subsp.lactis
小蛇菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒供應商小鼠抗心磷脂IgM(ACA-IgM)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse anti-cardiolipin antibody IgM,ACA-IgM ELISA Kit特價促銷

小鼠抗血小板IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA試劑盒 英文名稱：Mouse platelet antibodies IgG/M/A,PA-IgG/M/A ELISA Kit特價促銷

OAT4L又稱URAT1 (Urate Transporter 1) 尿酸鹽重吸收轉運子1 (抗原)Multi-class antibodies規格： 0.5mg

Anti-CD328/Siglec-7 唾液酸結合性免疫球蛋白樣凝集素7Multi-class antibodies規格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh ORAV1 高表達的蛋白1 規格 0.2ml

CIB2 Kit Human 人 CIB2 ELISA配對 ELISA

TRIP 英文名稱： 壞死因子受體相互作用蛋白 0.1ml

Cathepsin L 英文名稱： 組織蛋白酶L 0.1ml

Anti-DP-II 橋粒斑蛋白2Multi-class antibodies規格： 0.2ml

mouse Caspase-6 小鼠Caspase-6Multi-class antibodies規格： 48T

Anti-FLT-3/CD135 FMS樣酪氨酸激酶3Multi-class antibodies規格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Mouse Anti-rabbit IgG/PE-CY5 PE-CY5標記的小鼠抗兔IgG 規格 0.1ml

Beta-Nph(Human Beta-naphthol) ELISA Kit 人β酚 96T

phospho-Smad3 (Ser423) 英文名稱： 磷酸化細胞信號轉導分子SMAD3 0.1ml

ADAM17 英文名稱： 壞死因子α轉換酶 0.1ml

Anti-CD226/DNAM-1/FITC 熒光素標記CD226IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml

sE-selectin ELISA Kit 大鼠可溶性E選擇素Multi-class antibodies規格： 48T

Anti-Aggrecan/FITC 熒光素標記軟骨蛋白聚糖/可聚蛋白多糖IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh FBXO33 F-box蛋白相關蛋白33 規格 0.2ml

HBsAb(Mouse hepatitis B virus surface antibody) ELISA Kit 小鼠表面 96T

MLF1 Interacting Protein 英文名稱： 卡波西氏病毒潛伏核抗原相互作用蛋白1 0.1ml

CLIP2 英文名稱： 細胞質連接蛋白2 0.2ml

Anti-phospho-IRS1(Ser1101) 磷酸化受體底物-1Multi-class antibodies規格： 0.1ml

Gzms-B(Human granzymes B) ELISA Kit 人顆粒酶BMulti-class antibodies規格： 48T

Anti-NSBP1 核小體結合蛋白1Multi-class antibodies規格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh IFN-Beta 干擾素β 規格 0.1ml

CCP(Human anti-cyclic citrullinated peptide) ELISA Kit 人抗環胍酸肽 96T

pan methyl Lysine 英文名稱： 泛甲基賴酸 0.2ml