產地 | 進口、國產 |
品牌 | 聯祖 |
貨號 | LZR4062 |
用途 | 公司產品僅用于科研 |
包裝規格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
寄生水霉探針法熒光定量PCR試劑盒規格 | Saprolegnia parasitica | LZR4062 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環步驟 | 溫度 | 時間 | 循環數 |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產品:
平臍儒孢菌CFD (Complement Factor D) ELISA Kit用途: 研究
猴頭菌—50043復壯GPI (Glucose 6 Phosphate Isomerase) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
甲酚斯魯夫酵母TNF-β (Tumor Necrosis Factor Beta) ELISA Kit 拉丁屬名: Slooffia cresolica
產硫化物嗜鹽堿紅菌PCDH1 (Protocadherin 1) ELISA Kit拉丁屬名: Natronorubrum sulfidifaciens
草酸青霉NEFL (Neurofilament, Light Polypeptide) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
釀酒酵母MUC7 (Mucin 7) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
黑曲霉ANG-R-Tie2 (Angiopoietin Receptor Tie2) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus niger
圈卷產色鏈霉菌SLPI (Secretory Leukocyte Protease Inhibitor) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces ansochromogenes
白乳菇12-HETE (12-Hydroxyeicosatetraenoic Acid) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
弗雷德里克斯堡假單胞菌CHD5 (Chromodomain Helicase DNA Binding Protein 5) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas frederiksbergensis
蘋果鏈格孢IL-8 (Interleukin 8) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
土壤貪噬菌C/EBPα (CCAAT/Enhancer Binding Protein Alpha) ELISA Kit 拉丁屬名: Variovorax ginsengisoli
薔薇生鏈格孢C5 (Complement Component 5) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
芥黃蜜環菌VWF (Von Willebrand Factor) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
粗壯假絲酵母IRAK3 (Interleukin 1 Receptor Associated Kinase 3) ELISA Kit拉丁屬名: Candida valida
寄生水霉探針法熒光定量PCR試劑盒規格Anti-Connexin-45 間隙連接蛋白45Multi-class antibodies規格: 0.1ml
小鼠樣生長因子結合蛋白1(IGFBP-1)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Insulin-like growth factor binding protein 1,IGFBP-1 ELISA Kit 進口/原裝
小鼠樣生長因子結合蛋白2(IGFBP-2)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Insulin-like growth factor binding protein 2,IGFBP-2 ELISA Kit 特價促銷
小鼠樣生長因子結合蛋白6(IGFBP-6)ELISA試劑盒 英文名稱:Mouse Insulin-like growth factor binding protein 6,IGFBP-6 ELISA Kit 進口/原裝
小鼠原(PI)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Proinsulin,PI ELISA Kit特價促銷
小鼠自身(IAA)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse insulin autoantibodies,IAA ELISA Kit進口/原裝
IL-4 大鼠白介素-4Multi-class antibodies規格: 48T
Caspase-7 英文名稱: 半胱胺酸蛋白酶蛋白-7 0.1ml
Anti-GCN2 蛋白激酶GCN2蛋白Multi-class antibodies規格: 0.2ml
SP-D(Human Pulmonary surfatcant-associated protein D) ELISA Kit 人肺表面活性物質相關蛋白DMulti-class antibodies規格: 48T
Anti-HPV16-E6 人類狀瘤病毒16Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh MCHR/GPR24 G蛋白偶聯受體24 規格 0.1ml
CYP21B(Human Cytochrome P450c21/21-hydroxylase) ELISA Kit 人細胞色素P450c21B/21-羥化酶 96T
Phospho-Rictor (Thr1135) 英文名稱: 磷酸化雷帕霉素靶蛋白復合體2 0.1ml
VGLL1 英文名稱: 轉錄輔助因子退變樣蛋白1 0.2ml
DENND2C 英文名稱: MAP激酶激活死亡域蛋白2C 0.2ml
Anti-AQP3 水通道蛋白-3Multi-class antibodies規格: 0.1ml
EST1A 英文名稱: 端粒酶結合蛋白EST1A 0.2ml
微管蛋白 Anti-Tubulin-α 0.1ml
Anti-Phospho-TrkA (Tyr785)/TrkB (Tyr816) /FITC 熒光素標記磷酸化酪氨酸激酶AIgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Insulin Receptor Beta(Tyr1345) 磷酸化受體β 規格 0.1ml
Claudin 8 英文名稱: 緊密連接蛋白8 0.2ml
Anti-GTP cyclohydrolase 1/GTP-CH-1 三磷酸鳥苷環水解酶Multi-class antibodies規格: 0.2ml
Cav-1(Human Caveolin-1) ELISA KIT 人窖蛋白Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-Phospho-HER2(Tyr1248) 磷酸化HER2受體Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Microcephalin 1/BRIT1 小腦癥基因1/認知相關蛋白 規格 0.2ml
cath-D(Human cathepsin D) ELISA Kit 人組織蛋白酶D 96T
RED 英文名稱: 軟相關蛋白2 0.2ml