- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào):LZR4052
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-19
- 更新日期: 2025-01-10
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號(hào) | LZR4052 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
蒙得維的沙門氏菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒供應(yīng)商 | Salmonella montevideo | LZR4052 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
苜蓿中華根瘤菌CNTN4 (Contactin 4) ELISA Kit 用途: 與葫蘆巴(Trigomella)共生固氮
毛云芝ACTH (Adrenocorticotropic Hormone) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
艾阿華諾卡氏菌PLA2G2A (Phospholipase A2, Group II A) ELISA Kit拉丁屬名: Nocardia iowensis
乳酒假絲酵母S100A12 (S100 Calcium Binding Protein A12) ELISA Kit拉丁屬名: Candida kefyr
蜜蜂生球擬酵母GRβ (Glucocorticoid Receptor Beta) ELISA Kit 拉丁屬名: Torulopsis apicola
漏斗棱孔菌Smad3/MADH3 (Mothers Against Decapentaplegic Homolog 3) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
枯草芽孢桿菌NE/ELA2 (Elastase 2, Neutrophil) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis
食品檢測(cè)用O157:H7大腸埃希氏菌8-epi-PGF2α (8-Epi-Prostaglandin F2 Alpha) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli O157:H7 for Food Analysis
泡盛曲霉CYPD (Cyclophilin D) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus awamori
盾殼霉FRA (Fibronection Related Antigen) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
刺糖多孢菌(可訂)PLA2G2D (Phospholipase A2, Group II D) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharopolyspora spinosa
少孢哈薩克斯坦酵母SPB (Pulmonary Surfactant Associated Protein B) ELISA Kit 拉丁屬名: Kazachstania exigua
洋蔥伯克霍爾德氏菌TNFRSF1A (Tumor Necrosis Factor Receptor Superfamily, Member 1A) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
黑木耳DPYSL2 (Dihydropyrimidinase Like Protein 2) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
橘黃裸傘sCKR (Soluble Cytokine Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Gymnopilus spectabilis
蒙得維的沙門氏菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒供應(yīng)商Anti-CAS/CSE1 細(xì)胞凋亡敏感性基因Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(PACAP)ELISA試劑盒 英文名稱:Mouse pituitary adenylate cyclase activating polypeptide,PACAP ELISA Kit 進(jìn)口/原裝
小鼠雌二醇(E2)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Estradiol,E2 ELISA Kit進(jìn)口/原裝
小鼠雌二醇受體(ER)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Estradiol receptor,ER ELISA Kit特價(jià)促銷
小鼠雌激素(E)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse estrogen,E ELISA Kit特價(jià)促銷
小鼠雌三醇(E3)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Estriol,E3 ELISA Kit進(jìn)口/原裝
TSHR (Thyroid stimulating hormone receptor) 促甲狀腺素受體抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Caspase-1 P10 英文名稱: 天冬酸-胱酸特異性蛋白酶家族 0.1ml
Anti-CCL15/MIP5 巨噬細(xì)胞炎性蛋白15Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Annexin V 膜粘連蛋白-5(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-Cateninma gamma gamma連環(huán)蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh PCDHGA7 原鈣粘蛋白γA7 規(guī)格 0.2ml
LAYN Kit Human 人 Layilin / LAYN ELISA配對(duì) ELISA
phospho-Tau protein(Ser673) 英文名稱: 磷酸化微管相關(guān)蛋白 0.1ml
AFP(A4) 英文名稱: 甲胎蛋白單克隆(檢測(cè)) 0.1ml
Anti-CD3/PE 熒光素PE標(biāo)記CD3IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
GRH ELISA Kit 大鼠促生長(zhǎng)激素釋放激素Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-AT1/FITC 熒光素標(biāo)記緊張素IIgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh FAK/PTK2 粘著斑激酶 規(guī)格 0.1ml
TPO-Ab(Mouse anti-Thyroid-Peroxidase antibody) ELISA Kit 小鼠抗甲狀腺過(guò)氧化物酶 96T
Mesothelin 英文名稱: 間皮素 0.1ml
Claudin 1 英文名稱: 緊密連接蛋白1 0.2ml
Anti-Profilin 2 前纖維蛋白2Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
ADV-IgG(Human Adenovirus IgG) ELISA Kit 人腺病毒IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-kappa Opioid receptor kappa型受體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Langerin/CD207 白細(xì)胞分化抗原CD207 規(guī)格 0.2ml
PF/PFP(Rat Perforin/Pore-forming protein) ELISA Kit 大鼠穿孔素 96T
P2RX1 英文名稱: 三磷酸腺苷受體受體P2X1 0.2ml