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PCR反應鑒定——PCR反應條件:

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析，提供實驗報告給您。

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因，較佳地管家基因，優選地為RPPH1的擴增區域，其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

以下列是公司正在熱銷的產品：

RhodococcusCTSL (Cathepsin L) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

植物乳桿菌CRH (Corticotropin Releasing Hormone) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus plantarum

叢毛單胞菌（可定）DNM2 (Dynamin 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Comamonas sp.

金黃色葡萄球菌BAD (Bcl2 Associated Death Promoter) ELISA Kit 拉丁屬名: Staphylococcus aureus

紫云英根瘤菌*GLUT3 (Glucose Transporter 3) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizobium astragali

藤黃微球菌MCP/CD46 (Membrane Cofactor Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Micrococcus luteus

巴斯德畢赤酵母HNRPA2B1 (Heterogeneous Nuclear Ribonucleoprotein A2/B1) ELISA Kit用途: 表達、分泌 磷脂酶

地衣芽孢桿菌Anti-CIIAb (Anti-Type II Collagen Antibody) ELISA Kit  拉丁屬名: Bacillus  licheniformis

極單胞菌屬CD30 (Cluster of Differentiation 30) ELISA Kit拉丁屬名: Polaromonas glacialis

克魯斯假絲酵母SPARC (Secreted Protein Acidic And Rich In Cysteine) ELISA Kit拉丁屬名: Candida krusei

糙皮側耳ATGA/TGAB (Anti-Thyroid-Globulin Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Pleurotus ostreatus

球毛殼菌（可訂購）P-GP (Permeability Glycoprotein) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

綠木霉NFRκB (Nuclear Factor Related To Kappa B Binding Protein) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

副豬嗜血桿菌S100B (S100 Calcium Binding Protein B) ELISA Kit 拉丁屬名: parasuis

假單胞菌ANG II R2-Ab (Angiotensin II Receptor 2 Antibody) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
禽沙門氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書Phospho-Aurora B (Thr232) + Aurora C (Thr198) 英文名稱： 磷酸化有絲分裂激酶B/C 0.1ml

Anti- Gamma-Adaptin/FITC 熒光素標記銜接蛋白γIgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml

cGMP(Mouse Cyclic guanosine monophosphate) ELISA Kit 小鼠環磷酸鳥苷Multi-class antibodies規格： 48T

Anti-CD86/B7-2 /FITC 熒光素標記CD86IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Donkey Anti-rabbit IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的驢抗兔IgG 規格 0.1ml

Ferritin 鐵蛋白 96T

MYO6 英文名稱： 肌球蛋白6 0.2ml

Caspase 2 英文名稱： 半胱胺酸蛋白酶-2 0.1ml

Anti-Lamin B 核纖層蛋白BMulti-class antibodies規格： 0.2ml

GHRP(Human Growth Hormone Releasing Peptide) ELISA Kit 人生長激素釋放多肽Multi-class antibodies規格： 48T

Anti-LFABP/FABP-2 肝臟型脂肪酸結合蛋白Multi-class antibodies規格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh KLHL25 Kelch樣蛋白25 規格 0.2ml

PF-3 ELISA Kit 大鼠血小板因子3 96T

PEA3 英文名稱： 瘤促活化因子3 0.2ml

ASCL2 英文名稱： ASCL2蛋白 0.2ml

Anti-CCL28/FITC 熒光素標記粘膜相關上皮趨化因子MECIgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml

AGEs(Mouse advanced glycation end products) ELISA Kit 小鼠晚期糖基化終末產物Multi-class antibodies規格： 48T

Anti-CCL5/RANTES/FITC 熒光素標記調節活化的正常T細胞表達和分泌的因子IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh EGF 表皮生長因子(大鼠) 規格 0.1ml

c (Rabbit cardiac isoform of Tropnin T) ELISA Kit 兔心肌特異性肌鈣蛋白T 96T

MNX1 英文名稱： 運動神經元及胰腺同源蛋白1 0.2ml

CLASP2 英文名稱： 細胞連接相關蛋白2 0.1ml

Anti-phospho-P53 (Ser6) 磷酸化抑制基因P53Multi-class antibodies規格： 0.1ml

Alpha1 Beta-GP(Human Alpha1 Beta glycoprotein) ELISA Kit 人α1β糖蛋白Multi-class antibodies規格： 48T

Anti-PCNA 增殖細胞核抗原Multi-class antibodies規格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh HNF4/TCF4/HNF4A 肝細胞核因子4α 規格 0.1ml

VB6 ELISA Kit 大鼠維生素B6 96T

PAX4 英文名稱： 配對盒同源基因4 0.1ml