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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
莫氏立克次體探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號:LZR4031
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-19
  • 更新日期: 2025-01-10
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號 LZR4031
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號
是否進(jìn)口

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

 

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

莫氏立克次體探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

Rickettsia mooseri

LZR4031


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

米曲霉F9 (Coagulation Factor Ⅸ) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus  oryzae

殼梭孢屬(都不提供)PAEP (Progestagen-Associated Endometrial Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Fusicoccum sp.

枯草芽孢桿菌SCG2 (Secretogranin II) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus  subtilis

鉛黃腸球菌PCP (Procollagen C Peptidase)ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

粉紫小菇BPI (Bactericidal/Permeability Increasing Protein) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

假絲酵母屬RARα (Retinoic Acid Receptor Alpha) ELISA Kit拉丁屬名: Candida  sp.

青霉C3b (Complement Fragment 3b) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

香菇*iPLA2 (Phospholipidase A2, Calcium Independent) ELISA Kit拉丁屬名: Lentinus edodes (Berkeley) Singer

雷夫松氏菌NMP-22 (Nuclear Matrix Protein 22) ELISA Kit拉丁屬名: Leifsonia sp.

蘇云金芽孢桿菌庫爾斯塔克亞種CTGF (Connective Tissue Growth Factor) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

釀酒酵母THRSP (Thyroid Hormone Responsive) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

枯草芽孢桿菌FABP3 (Fatty Acid Binding Protein 3, Muscle and Heart) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus  subtilis

遠(yuǎn)青鏈霉菌CNP (C-type Natriuretic Peptide) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces azureus

卷枝毛霉卷枝變型HSPβ6/HSP-20 (Heat Shock Protein Beta 6) ELISA Kit拉丁屬名: Mucor circinelloides f. circinelloides

日本根霉TCF20 (Transcription Factor 20) ELISA Kit 拉丁屬名: Rhizopus  japonicus
莫氏立克次體探針法熒光定量PCR試劑盒說明書FECH 英文名稱: 鐵螯合酶 0.1ml

/鈣調(diào)蛋白依賴蛋白激酶IG Anti-Camk1g 0.1ml

Anti-TWIST protein/FITC 熒光素標(biāo)記TWIST轉(zhuǎn)錄因子蛋白IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-HSL (Ser959+960) 磷酸化荷爾蒙敏感脂肪酶 規(guī)格 0.1ml

CBX3/HP1 gamma homolog(Chromobox homolog 3) 染色盒同源物3抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

大鼠紅細(xì)胞生成素(EPO)ELISA試劑盒 英文名稱:Rat Erythropoietin,EPO ELISA Kit進(jìn)口/原裝

大鼠紅細(xì)胞生成素受體(EPOR)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Erythropoietin receptor,EPOR ELISA Kit特價促銷

CARD4 英文名稱: 凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白4 0.2ml

Anti-phospho-Ephrin B (Tyr317) 磷酸化Ephrin BMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

KGF 大鼠角蛋白生長因子Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-ENPP3/CD203c ENPP3IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh MURF2 肌肉特異性環(huán)指蛋白2 規(guī)格 0.2ml

f-Hb(Human free haemoglobin) ELISA Kit 人游離血紅蛋白 96T

SLCO3A1 英文名稱: 可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3A1 0.2ml

Anti-BCHE 丁酰膽堿酯酶單克隆Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

EDG1 英文名稱: 內(nèi)皮細(xì)胞分化鞘脂G蛋白偶聯(lián)受體1 0.1ml

CREB結(jié)合蛋白 Anti-CBP 0.1ml

Anti-ULBP1/N2DL1/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠UL16結(jié)合蛋白1蛋白IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Histone H3 (Ser28) 磷酸化組蛋白H3 規(guī)格 0.1ml

VEGF(Vascular endothelial growth factor) 內(nèi)皮生長因子(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

人前列環(huán)素(PGI)ELISA試劑盒 英文名稱:Human prostacycline,PGI ELISA Kit特價供應(yīng)

CKAP4 英文名稱: 細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白4 0.2ml

Anti-LRIG1 LRIG1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

PIPLC(Human phosphoinositide-specific phospholipase C) ELISA Kit 人磷酯酰肌醇特異性磷酯酶CMulti-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-Phospho-NEDD4L (Ser342) 磷酸化泛素連接酶NEDD4-2Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh IL5RA/CD125 白介素-5受體α鏈IL-5Rα 規(guī)格 0.1ml

PI Ab-IgG/IgM(human phosphatidylinositol antibody IgG/IgM) ELISA Kit 人磷脂酰肌醇IgG/IgM 96T

Prostaglandin dehydrogenase 1 英文名稱: 素脫氫酶1 0.1ml

 


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