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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR4029
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-19
- 更新日期： 2025-01-10
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR4029 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
馬紅球菌探針法熒光定量PCR試劑盒 | Rhodococcus equi | LZR4029 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
枯草芽孢桿菌GSTs (Glutathione S-Transferases) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
放線纖維菌VEGF (Vascular Endothelial Cell Growth Factor ) ELISA Kit 拉丁屬名: Actinotalea sp.
球形芽孢桿菌PAF (Platelet Activating Factor) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus sphaericus
孔雀石褐鏈霉菌FcεR I (Receptor I for the Fc Fragment of IgE) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces malachitofuscus
鼠李糖乳桿菌GAL9 (Galectin 9 ) ELISA Kit 拉丁屬名: Lactobacillus rhamnosus
蠟樣芽孢桿菌ApoA4 (Apolipoprotein A4) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus cereus
產(chǎn)氣莢膜梭菌 毒素C型MAP2K1 (Mitogen Activated Protein Kinase Kinase 1) ELISA Kit拉丁屬名: perfringens Type C
乳桿菌HHIP (Hedgehog Interacting Protein) ELISA Kit 拉丁屬名: Lactobacillus sp.
紫丁香蘑LAB7-2/CD86 (B-Lymphocyte Activation Antigen B7-2) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
嗜熱鏈球菌PON3 (Paraoxonase 3) ELISA Kit拉丁屬名: Streptococcus thermophilus
芽胞桿菌GM-CSF Ab (Anti-Granulocyte Macrophage Colony Stimulating Factor Antibody) ELISA Kit 用途: 分類、研究，具有作為動(dòng)物益生菌、 飼料淀粉酶潛力。
谷氨酸棒桿菌NT-ProANP (N-Terminal Pro Atrial Natriuretic Peptide) ELISA Kit 拉丁屬名: Corynebacterium glutamicum
釀酒酵母SNCα (Synuclein Alpha) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
涎沫假絲酵母CD59 (Protectin) ELISA Kit 拉丁屬名: Candida zeylanoides
英諾克李斯特菌MIP-1α (Macrophage Inflammatory Protein 1 Alpha) ELISA Kit 拉丁屬名: Listeria innocua
馬紅球菌探針法熒光定量PCR試劑盒 Rhesus antibody Rh RbAp48 視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤結(jié)合蛋白P48 規(guī)格 0.2ml
Anti-OPN/FITC 熒光素標(biāo)記骨橋蛋白IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Trx ELISA Kit 大鼠硫氧化還原蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Tenascin C (C terminal) 細(xì)胞粘合素(C端)腱糖蛋白-C(固生蛋白)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh GLUR2 谷氨酸受體2 規(guī)格 0.1ml
8-iso-PG ELISA Kit 大鼠8異素 96T
NDUFV2 英文名稱： NADH脫氫酶黃素蛋白2 0.1ml
CARD15 英文名稱： 凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白15 0.1ml
Anti-IL-1 Beta/IL-1B 白介素1βMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
AAA(Human anti-Actin antibody) ELISA Kit 人抗肌動(dòng)蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-IL-2 白介素2(大、小鼠)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh LRP12 受體相關(guān)蛋白12(抑制蛋白7) 規(guī)格 0.2ml
GSH-Px(Human Glutathione peroxidase) ELISA Kit 人谷胱甘肽過氧化酶 96T
phospho-c-Raf(Ser43) 英文名稱： 磷酸化原癌基因c-Raf 0.1ml
ADNP 英文名稱： 活性依賴的神經(jīng)保護(hù)肽 0.1ml
Anti-ABCG1/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠ABCG1IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
SCFR ELISA Kit 大鼠干細(xì)胞因子受體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Ang- II /FITC 熒光素標(biāo)記緊張素IIIgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh FAS/Apo-1/CD95 載脂蛋白A1 規(guī)格 0.1ml
CD44 ELISA Kit 大鼠CD44分子 96T
MUC5AC 英文名稱： 胃粘液素 0.2ml
CKAP1 英文名稱： 細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白1/微管蛋白折疊輔助因子B 0.2ml
Anti-P73 protein P73抑制基因Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Tie-2(Human tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 2 ELISA Kit 人生成素受體/含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域酪氨酸激酶2Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-OLFM1 嗅球蛋白1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Id1 DNA結(jié)合抑制因子1 規(guī)格 0.2ml
PCNA(Mouse proliferating cell nuclear antigen antibody)ELISA Kit 小鼠抗增殖細(xì)胞核抗原 96T
PDCD10 英文名稱： 凋亡相關(guān)蛋白10 0.2ml
