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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR4026
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-18
- 更新日期： 2025-01-10
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR4026 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶(hù)只需提供樣品和待檢測(cè)名稱(chēng)即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
米黑根毛霉探針?lè)晒舛縋CR試劑盒規(guī)格 | Rhizomucor miehei | LZR4026 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
以下列是公司正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品：
釀酒酵母EL (EuglobulinLysis) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
缺陷短波單胞菌AMBP (Alpha-1-Microglobulin/Bikunin Precursor) ELISA Kit拉丁屬名: Brevundimonas diminuta
球毛殼菌CRYαB (Crystallin Alpha B) ELISA Kit 拉丁屬名: Chaetomium globosum Kunze
肉色諾卡氏菌 PSAP (Prosaposin) ELISA Kit 拉丁屬名: Nocardia carnea
大奇異球菌IL-5 (Interleukin 5) ELISA Kit拉丁屬名: Deinococcus grandis
枯草芽孢桿菌SELE (E-Selectin) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis
雙孢鐮孢PADI4 (Peptidyl Arginine Deiminase Type IV) ELISA Kit拉丁屬名: Fusarium dimerum
林肯鏈霉菌TCGF-Ⅲ (Tcell Growth Factor Ⅲ) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces lincolnensis
毛頭鬼傘IP-10/CXCL10 (Interferon Gamma Induced Protein 10kDa) ELISA Kit拉丁屬名: Coprinus comatus
牛奶 三聚胺FADS2 (Fatty Acid Desaturase 2) ELISA Kit拉丁屬名: 牛奶 三聚胺
新城疫病毒IL-20 (Interleukin 20) ELISA Kit拉丁屬名: Newcastle disease virus
地下諾爾氏菌GLUT2 (Glucose Transporter 2) ELISA Kit拉丁屬名: Knoellia subterranea
戊糖乳桿菌PKIβ (Protein Kinase Inhibitor Beta) ELISA Kit 拉丁屬名: Lactobacillus pentosus
根瘤菌BF (Factor B) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
人參地土地桿菌SUMO2 (Small Ubiquitin Related Modifier 2) ELISA Kit拉丁屬名: Pedobacter panaciterrae
米黑根毛霉探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒規(guī)格VEGF-B 英文名稱(chēng)： 內(nèi)皮生長(zhǎng)因子B 0.1ml
DUOX2 英文名稱(chēng)： 雙氧化酶2/甲狀腺氧化酶2 0.2ml
Anti-phospho-AMPK beta 1(Ser182) 磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Ecm2 英文名稱(chēng)： 細(xì)胞外基質(zhì)蛋白2 0.1ml
神經(jīng)纖毛蛋白-1 Anti-NRP-1 0.1ml
Anti-Slit2/Slil3/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠神經(jīng)遷移蛋白Slit2/3IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-p107(Thr369) 磷酸化視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤樣蛋白p107 規(guī)格 0.1ml
Carboxypeptidase H 英文名稱(chēng)： 胰羧肽酶E 0.2ml
Anti-GP65/SDFR1/NPTN 間質(zhì)細(xì)胞衍化因子受體1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
CK-18(Human cytokeratin 18) ELISA Kit 人細(xì)胞角蛋白18Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-HDAC1/HD1 組蛋白去乙酰化酶1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Menin/Men1 Menin蛋白 規(guī)格 0.2ml
PON(Human paraoxonase) ELISA Kit 人對(duì)氧磷酶 96T
RBBP5 英文名稱(chēng)： 視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤結(jié)合蛋白5 0.2ml
DAZ4 英文名稱(chēng)： 缺失基因4 0.1ml
Anti-APC/Adenomatous Polyposis Coli 腺瘤樣Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
eIF3F 英文名稱(chēng)： 真核翻譯起始因子3F 0.1ml
內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體-3 Anti-VEGFR-3 0.1ml
Anti-TSARG6/FITC 熒光素標(biāo)記生精細(xì)胞凋亡相關(guān)基因6IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-IKKi/IKKe(Ser172) 磷酸化核因子NFκB抑制蛋白激酶i 規(guī)格 0.1ml
TGF- Beta2 (Ttansforming Growth Factor – Beta2) 轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子–β2(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
CK6 英文名稱(chēng)： 細(xì)胞角蛋白6 0.1ml
Anti-phospho-IKK alpha (Tyr463) 磷酸化KB抑制蛋白激酶αMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
C.albicans(Human Candida Albicans) ELISA Kit 人白色念珠菌Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Jak3 蛋白酪氨酸激酶JAK-3Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh L-Citrulline L-瓜氨酸 規(guī)格 0.2mg
uE3(Human ultra Estriol) ELISA KIT 人超敏游離雌三醇 96T
RHOBTB1 英文名稱(chēng)： Rho相關(guān)結(jié)構(gòu)域BTB蛋白質(zhì)1 0.2ml
