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- 品牌：聯祖
- 產地：進口、國產
- 貨號：LZR4007
- 價格： ￥3800/盒
- 發布日期： 2020-11-18
- 更新日期： 2025-01-10
| 產地 | 進口、國產 |
| 品牌 | 聯祖 |
| 貨號 | LZR4007 |
| 用途 | 公司產品僅用于科研 |
| 包裝規格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
鼻疽假單胞菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | Pseudomonas mallei | LZR4007 |
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環步驟 | 溫度 | 時間 | 循環數 |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規參照基因，較佳地管家基因，優選地為RPPH1的擴增區域，其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析，提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產品：
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URP2 英文名稱： 整合素結合性信號分子 0.1ml
DAP5 英文名稱： 死亡相關蛋白5 0.1ml
Anti-ATXN1 失調癥蛋白1Multi-class antibodies規格： 0.2ml
Etv5 英文名稱： 轉錄因子Ets差異基因5 0.2ml
CAMKK2 英文名稱： 鈣調蛋白激酶激酶β 0.1ml
Anti-EDG2/LPA1 溶血磷脂酸受體蛋白1Multi-class antibodies規格： 0.2ml
MYD88(Human myeloid differentiation primary response gene 88) ELISA Kit 人髓樣分化因子初次應答基因88Multi-class antibodies規格： 48T
Anti-PAX2 配對盒基因2Multi-class antibodies規格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh HORMAD2 異質核糖核蛋白U2樣蛋白 規格 0.2ml
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Anti-BAFFR/Tnfrsf13c/CD268/FITC 熒光素標記B細胞活化因子受體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh ET-1(2C4) 內皮素-1單克隆 規格 0.2ml
sCKR(Human soluble cytokine receptor) ELISA Kit 人可溶性細胞因子受體 96T
MSK1 英文名稱： 有絲分裂原和應激活化型蛋白激酶1 0.2ml
CIRBP 英文名稱： 冷誘導RNA結合蛋白 0.2ml
Anti-phospho-P53 (Thr18) 磷酸化抑制基因P53Multi-class antibodies規格： 0.1ml
MLKL(Human mixed lineage kinase domain-like) ELISA Kit 人混合系列蛋白激酶樣結構域Multi-class antibodies規格： 48T
Anti-Paxillin 樁蛋白PaxillinMulti-class antibodies規格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh hnRNP R 異質性核糖核蛋白R 規格 0.2ml
AMA IgA(Human anti-myelin antibody IgA) ELISA Kit 人抗髓磷脂IgA 96T
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