產地 | 進口、國產 |
品牌 | 聯祖 |
貨號 | LZR4005 |
用途 | 公司產品僅用于科研 |
包裝規格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
綠膿假單胞菌探針法熒光定量PCR試劑盒 | Pseudomonas aeruginosa | LZR4005 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環步驟 | 溫度 | 時間 | 循環數 |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產品:
大腸埃希氏菌Gal (α-Galactoyl) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli
栗疫菌Anti-Surv (Anti-Survivin Antibody) ELISA Kit 拉丁屬名: Cryphonectria parasitica
灰玫瑰青霉D2D (D-Dimer) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium griseoroseum
墻支頂孢MPA (Mycophenolic Acid) ELISA Kit拉丁屬名: Acremonium murorum
蘇云金芽孢桿菌POMC (Pro-Opiomelanocortin) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
科恩氏菌ApoD (Apolipoprotein D) ELISA Kit 拉丁屬名: Cohnella panacarvi
球形賴氨酸芽孢桿菌IL-13 (Interleukin 13) ELISA Kit 拉丁屬名: Lysinibacillus sphaericus
美澳型核果褐腐病菌NUP153 (Nucleoporin 153kDa) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
短波單胞菌CKLFSF7 (Chemokine Like Factor Superfamily 7) ELISA Kit用途: 能于30℃、48小時內降解82%以上的濃度為60μL/100m的十八烷,對十八烷為碳源(無機鹽培養基)
白鱗炭角菌SRF/IF (Skin Reactive Factor/Inflammatory Factor) ELISA Kit拉丁屬名: Xylaria curta
斯氏李斯特氏菌LTβ (Lymphotoxin Beta) ELISA Kit拉丁屬名: Listeria seeligeri
變天藍鏈霉菌CDK7 (Cyclin Dependent Kinase 7) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces coerulescens
糞鞘氨桿菌TrxR1 (Thioredoxin Reductase 1) ELISA Kit拉丁屬名: Sphingobacterium faecium
根瘤菌MTX (Methotrexate) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
短芽孢桿菌屬GKRP (Glucokinase Regulatory Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Brevibacillus aydinogluensis
綠膿假單胞菌探針法熒光定量PCR試劑盒 Human fibromodulin,FMOD ELISA Kit 人纖調蛋白 96T
TXNIP 英文名稱: 硫氧還蛋白結合蛋白2 0.2ml
CEMP1 英文名稱: 牙骨質蛋白1 0.1ml
Anti-CD151/MER2/PETA-3 CD151Multi-class antibodies規格: 0.2ml
epithelial Sodium Channel gamma 英文名稱: 上皮鈉離子通道蛋白γ/γENaC 0.2ml
突觸相關膜蛋白25 Anti-SNAP-25 0.1ml
Anti-TFPI-2/FITC 熒光素標記組織因子途徑抑制劑-2IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
CAMK4 英文名稱: 鈣/鈣調蛋白依賴性蛋白激酶4 0.1ml
Anti-Lingo-1 Nogo受體反應蛋白Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Lp-PL-A2(Human lipoprotein-associated phospholipase A2) ELISA Kit 人脂蛋白磷脂酶A2Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-MMP-9 基質金屬蛋白酶-9Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Involucrin 囊包蛋白/內披蛋白 規格 0.2ml
anti-HDV(Human anti-hepatitis D virus antibody) ELISA Kit 人 96T
PLGLB2 英文名稱: 纖溶酶相關蛋白B2 0.2ml
人雌激素(E)ELISA試劑盒英文名稱:Human estrogen,E ELISA Kit進口/原裝
人雌激素受體(ER)ELISA試劑盒英文名稱:Human Estrogen Receptor,ER ELISA Kit特價供應
人雌激素誘導蛋白PS2 ELISA試劑盒英文名稱:Human Estrogen-induced protein pS2 ELISA Kit特價促銷
LPLUNC1 人癌基因多肽抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg
Anti-ALR 肝再生增強因子Multi-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-c-Abl(Thr754) 磷酸化非受體酪氨酸激酶c-Abl 規格 0.1ml
鏈酶蛋白酶濃縮液(20X) 1ml 1% pH 7.2
Cip4 英文名稱: 細胞分化周期CDC42相互作用蛋白4 0.2ml
Anti-HSP47 熱休克蛋白-47Multi-class antibodies規格: 0.2ml
NT-proBNP(Human N-terminal pro-brain natriuretic peptide) ELISA KIT 人N端前腦鈉素Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-URG4 上調基因4(N端)Multi-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Mitofilin/IMMT 線粒體內膜蛋白 規格 0.2ml
DT(Human dopachrome tautomerase) ELISA Kit 人多巴色素異構酶 96T
Retinoid X receptor 英文名稱: 核受體RXRα 0.1ml