- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
- 貨號:LZR3976
- 價格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-18
- 更新日期: 2025-01-10
產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號 | LZR3976 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
豬腺病毒探針法熒光定量PCR試劑盒供應商 | Porcine Adenovirus(Swine Adenovirus) | LZR3976 |
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
牛布魯氏菌病間接ELISA抗體檢測試劑盒PCPE1 (Procollagen C Proteinase Enhancer 1 ) ELISA Kit 規(guī)格: 96孔板*2塊板
褐色馬勃Salusin α (Salusin Alpha) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
戊糖乳桿菌ApoE (Apolipoprotein E) ELISA Kit 拉丁屬名: Lactobacillus pentosus
雅致小克銀漢STAT2 (Signal Transducer and Activator of Transcription 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Cunninghamella elegans
雙鞘不黏柄菌Methylase ELISA Kit拉丁屬名: Asticcacaulis biprosthecium
擬莖點霉CD3d (Cluster of Differentiation 3d) ELISA Kit 拉丁屬名: Diaporthe sp.
巨型艾美耳球蟲SOD1 (Superoxide Dismutase 1, Soluble) ELISA Kit拉丁屬名: maxima
亞熱帶細小鏈孢菌α1-AGP (Alpha-1-Acid Glycoprotein) ELISA Kit
拉丁屬名: Catenulispora subtropica
金黃色葡萄球菌CX3CR1 (Chemokine C-X3-C-Motif Receptor 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Staphylococcus aureus
溜曲霉C/EBPβ (CCAAT/Enhancer Binding Protein Beta) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus tamarii
臺灣根霉S100A11 (S100 Calcium Binding Protein A11) ELISA Kit 拉丁屬名: Rhizopus formosensis
肉糜 鵝源性成分(定性)FG (Fibrinogen) ELISA Kit拉丁屬名: 肉糜 鵝源性成分(定性)
淡紫擬青霉MUC7 (Mucin 7) ELISA Kit用途: 用作生物防治研究
皮落青霉CAMK2α (Calcium/Calmodulin Dependent Protein Kinase II Alpha) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium crustosum
杏鮑菇EL (EuglobulinLysis) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
豬腺病毒探針法熒光定量PCR試劑盒供應商Claudin 22 英文名稱: 緊密連接蛋白22 0.1ml
Anti-Connexin-32 間隙連接蛋白32Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
E7 protein/HPV 16 (Human papillomavirus type 16) 人瘤病毒16型E7蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-CXCR7/RDC1 細胞表面趨化因子受體7Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh PAX8 配對盒基因8 規(guī)格 0.1ml
SERPINF2 Kit Mouse 小鼠 SerpinF2 ELISA配對 ELISA
TNFRSF19 英文名稱: 壞死因子配體超家族成員19 0.1ml
CADPS2 英文名稱: 鈣依賴分泌激活蛋白2/的相關(guān)蛋白 0.2ml
Anti-Leptin 瘦素Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Serpina3g(Human serine/cysteine peptidase inhibitor clade A member 3G) ELISA Kit 人絲氨酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子進化枝3GMulti-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-PAR-1/Thrombin receptor 蛋白酶激活受體-1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh HOXB5 同源盒蛋白HOXB5 規(guī)格 0.1ml
IL-1 Beta ELISA Kit 大鼠白介素1β 96T
Phospho-PLC beta3 (Ser1105) 英文名稱: 磷酸化磷酯酶Cβ3 0.1ml
Rhesus antibody Rh PACAP-27/38 腺苷酸環(huán)化酶激活肽-27/38 規(guī)格 0.1ml
MEP1A Kit Mouse 小鼠 MEP1A ELISA配對 ELISA
TPOR 英文名稱: 血小板生成素受體 0.1ml
CHL1 英文名稱: 神經(jīng)細胞粘附分子CALL 0.2ml
Anti-CD34 CD34Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
豬高鐵血紅蛋白(MHB)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine Methemoglobin,MHB ELISA Kit特價供應
豬睪酮(T)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine Testoterone,T ELISA Kit進口/分裝
Chondrocalcin 英文名稱: Ⅱ型膠原α1蛋白/軟骨鈣素 0.1ml
Anti-GLUR3/GRIA 3 谷氨酸受體3Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
SK(Human Streptokinase) ELISA Kit 人鏈激酶Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-NGF-beta 神經(jīng)生長因子-βMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh IL-17B 白介素-17B 規(guī)格 0.1ml
IL-2sR Beta ELISA Kit 大鼠白介素2可溶性受體β鏈 96T
phospho-PTPN7 (Ser93) 英文名稱: 磷酸化非受體型蛋白酪酸磷酸酶7 0.1ml