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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
青霉通用探針法熒光定量PCR試劑盒供應商
  • 品牌:聯祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:LZR3952
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-18
  • 更新日期: 2025-01-10
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 聯祖
貨號 LZR3952
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產品名稱

英文名稱

貨號

青霉通用探針法熒光定量PCR試劑盒供應商

Penicillium spp.

LZR3952

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產品:

貴州綠僵菌MGST1 (Microsomal Glutathione S Transferase 1) ELISA Kit 用途: 生物防治

粘蓋牛肝菌*MMP-7 (Matrix Metalloproteinase 7) ELISA Kit 拉丁屬名: Suillus bovinus

雞傷寒沙門氏菌PROS (Protein S) ELISA Kit拉丁屬名: gallinarum

大腸埃希氏菌ANP (Atrial Natriuretic Peptide) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli

柿盤多毛孢PUMA (P53 Upregulated Modulator of Apoptosis) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

AlbidiferaxTP53 (Tumor Protein p53) ELISA Kit拉丁屬名: Albidiferax sp.

南方鹽單胞菌RANTES (Regulated On Activation, Normal T-Cell Expressed And Secreted) ELISA Kit 拉丁屬名: Halomonas meridiana

維羅納假單胞菌RAG-2 (Recombination Activating Gene 2) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

大腸埃希氏菌CgB (Chromogranin B) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli

松口蘑FTL (Ferritin, Light Polypeptide) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

枯草芽孢桿菌MMP-2 (Matrix Metalloproteinase 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis

POMC (Pro-Opiomelanocortin) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

紫紅曲霉ADH (Antidiuretic Hormone) ELISA Kit拉丁屬名: Monascus purpureus

植物乳桿菌植物亞種INSR (Insulin Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus  plantarum subsp. plantarum

高溫放線菌科未定屬GSTpi (Glutathione S Transferases Pi) ELISA Kit拉丁屬名: Thermoactinomycetaceae  sp.
青霉通用探針法熒光定量PCR試劑盒供應商MMP-1(Mous ematrix metalloproteinases-1) 基質金屬蛋白酶-1(小鼠抗原)Multi-class antibodies規格: 0.5mg

Anti-CD33/Siglec-3 CD33Multi-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh PADI4 相關基因 規格 0.2ml

CLEC6A Kit Mouse 小鼠 CLEC4N / CLEC6A / Dectin-2 ELISA配對 ELISA

TPP1 英文名稱: 細胞生長抑制基因1蛋白 0.2ml

CD1A 英文名稱: T淋巴細胞CD1 0.1ml

Anti-CD33/Siglec-3 CD33Multi-class antibodies規格: 0.2ml

CAB39L 英文名稱: 鈣結合蛋白樣39 0.2ml

Anti-LH 促黃體生成素單克隆Multi-class antibodies規格: 0.1ml

sPLA2(Human secreted phospholipase A2) ELISA Kit 人分泌型磷脂酶A2Multi-class antibodies規格: 48T

Anti-NR2C/NMDAR2C 谷氨酸受體2C(N端)Multi-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh IGFBP4/IBP4 樣生長因子結合蛋白4 規格 0.1ml

GHRP(Mouse Growth Hormone Releasing Peptide) ELISA Kit 小鼠生長激素釋放多肽 96T

phospho-PTPRA(Tyr798) 英文名稱: 磷酸化酪酸磷酸酶α 0.1ml

Anti-phospho-ADRB2(Ser346) 磷酸化腎上腺素能受體β2Multi-class antibodies規格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-CBL2(Tyr774) 磷酸化原癌蛋白CBL2 規格 0.1ml

單組分AEC染色試劑盒 200片/20ml 需用甘油封固,紅色

VAPB 英文名稱: 囊泡相關膜蛋白相關的蛋白B 0.2ml

DNA polymerase mu 英文名稱: DNA聚合酶μ/DNA pol μ 0.2ml

Anti-phospho-ADRB2(Ser346) 磷酸化腎上腺素能受體β2Multi-class antibodies規格: 0.1ml

ETV3L 英文名稱: ETV3L蛋白 0.2ml

Chemokine Receptor D6 英文名稱: 趨化因子受體D6 0.1ml

Anti-HBeAg(1) 人e抗原(1)Multi-class antibodies規格: 0.1ml

TRAIL-R1(Human tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 1) ELISA Kit 人壞死因子相關凋亡誘導配體1Multi-class antibodies規格: 48T

Anti-TNFRSF18 糖皮質激素誘導壞死因子受體Multi-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Mouse Anti-Goat IgG/PE PE標記的小鼠抗羊IgG 規格 0.1ml

MLC(Human Myosin light Chain) ELISA Kit 人肌球蛋白輕鏈 96T

RAD50 英文名稱: DNA修復蛋白Rad50 0.2ml


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