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PCR反應鑒定——PCR反應條件:

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析，提供實驗報告給您。

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因，較佳地管家基因，優選地為RPPH1的擴增區域，其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

以下列是公司正在熱銷的產品：

蘑菇COL9α3 (Collagen Type IX Alpha 3) ELISA Kit拉丁屬名: Agaricus sp.

小單孢菌SOD2 (Superoxide Dismutase 2, Mitochondrial) ELISA Kit 拉丁屬名: Micromonospora sp.

異配囊接霉TFPI (Tissue Factor Pathway Inhibitor) ELISA Kit拉丁屬名: Mucor heterogamus

戴爾根霉VCL (Vinculin) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizopus  delemar

魯考弗美奇酵母BMPR1A (Bone Morphogenetic Protein Receptor, type IA) ELISA Kit拉丁屬名: Metschnikowia  reukaufii

凝結芽孢桿菌ANXA2 (Annexin A2) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus  coagulans

皺環球蓋菇C1q (Complement 1q) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

栗色鏈霉菌LOXL4 (Lysyl Oxidase Like Protein 4 ) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces castaneus

禽腦脊髓炎病毒DAT (Dopamine Transporter) ELISA Kit拉丁屬名: Avian       encephalomyetitis virus

假密環菌 拉丁屬名：Armillaria mellea 注意事項：僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

煙色離褶傘 注意事項：僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用 拉丁屬名：Lyophyllum 種名加詞：fumosum (Pers.) P.D. Orton 模式菌株：非模式菌株 主要用途：研究；教學 具體用途： 特征特性：子實體叢生一起，菌蓋較小，直徑1-5cm，半球形、扁半球形至平展，邊緣或稍翻起，初期灰褐或暗灰褐色，漸變灰褐到淺灰褐色，表面近平滑。菌肉白色或污白色。菌褶直生或彎生于稍延生，不等長，密，白至污白色。菌柄近圓柱形，彎曲，長3-9cm，粗0.5-6μm。孢子近球形或寬橢圓形，無色，光滑，5.5-7.5μm×5-7.5μm。秋季生林中地上，多生于闊葉林或混交林中地上，有記載與樹木形成菌根。

長柄大環柄菇 注意事項：僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用 拉丁屬名：Macrolepiota 種名加詞：dolichaula (Berk. & Broome) Pegler & R.W. Rayner 模式菌株：非模式菌株 主要用途：研究；教學 具體用途： 特征特性：子實體中等至較大,菌蓋扁半球形至扁平,具淺褐色細顆粒組成的鱗片,頂部鱗片密集,邊緣鱗片少.菌肉白色,菌褶白色,袍密,離生,不等長,菌柄細長,圓柱形,白色,基部膨大 

酸魚乳桿菌 拉丁屬名：Lactobacillus acidipiscis 用途：研究； 注意事項：僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

彎曲芽孢桿菌 拉丁屬名：Bacillus flexus 用途：研究；產果膠酶 注意事項：僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用 模式菌株：非模式菌株 主要用途：研究 具體用途：產果膠酶 特征特性：菌落白色，不透明，邊緣較規則，表面光滑。耐受8ug/ml Hg。菌落:圓、略干、鼓起、不透明、白、整齊、小。 

黃色微球菌 拉丁屬名：Micrococcus flavus 用途：模式菌株 注意事項：僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

小馬勃3-2 注意事項：僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用 拉丁屬名：Lycoperdon 種名加詞：pusillum Batsch ex Pers. 模式菌株：非模式菌株 主要用途：研究 具體用途： 特征特性：子實體小。菌蓋直徑1～1.8cm，高達2cm，近球形，初期白色，后變土黃色及淺茶色，無基部，由根狀菌絲索固定于基物上。外包被由細小易脫落的顆粒組成。內包被薄，光滑，成熟時*有小口，內部米黃色至淺茶色。孢子前黃色，近光滑，有時具短柄，球形，3～4µm。孢絲與孢子同色，分枝，粗3～4µm。

托拉斯假單胞菌 拉丁屬名：Pseudomonas tolaasii 注意事項：僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

小孢根霉須狀變種 拉丁屬名：Rhizopus microsporus var. rhizopodiformis 規格：凍干物 用途：產乳酸 注意事項：僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

脆弱擬桿菌 拉丁屬名：Bacteroides fragilis 規格：凍干物 注意事項：僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用 模式菌株:模式菌株 主要用途:分類；研究；教學 特征特性:桿菌，革蘭氏陰性菌，專性厭氧、無芽胞、無動力、0.5×1.3～1.6微米。最適溫度為37℃，最適ph值為7.0。生化反應弱，解糖，解酶反應陽性，葡萄糖的終末代謝產物有乙酸和琥珀酸；吲哚不定，耐膽鹽，水解七葉靈。不還原硝酸鹽。產生蘋果酸鹽脫氫酶、谷氨酸脫氫酶、葡萄糖6磷酸脫氫酶（g6pdh）、6磷酸葡萄糖脫氫酶（6pgdh）、細胞壁粘肽層含有二氨基庚二酸。 

肝色牛排菌 注意事項：僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用 拉丁屬名 ： Fistulina 種名加詞 ： hepatica (Schaeff.) With. 模式菌株 ： 非模式菌株 主要用途 ： 研究；教學 具體用途 ： 特征特性 ： 子實體中等大。肉質，有柄，軟而多汁，半圓形，匙形或舌形，暗紅色至紅褐色。菌蓋粘，有輻射狀條紋及短柔毛，寬9-10cm。菌內厚，剖面可見條紋。子實層生菌管內。菌管各自可分離，無共同管壁 ，密集排列在菌肉下面。管口土黃色，后變為褐色。 

香菇LILRB4 (Leukocyte Immunoglobulin Like Receptor Subfamily B Member 4) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

栗酒裂殖酵母LZM (Lysozyme) ELISA Kit拉丁屬名: Schizosaccharomyces pombe

枯草芽孢桿菌CKLFSF7 (Chemokine Like Factor Superfamily 7) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis

近緣毛殼EPHA3 (Ephrin Type A Receptor 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Chaetomium subaffine

貪銅菌（加詞待譯）BACE1 (Beta-site APP Cleaving Enzyme 1) ELISA Kit用途: Utilizes benzene, chlorobenzene, 2,4-dichlorophenol, 2,6-dichlorophenol, phenol, toluene

大腸埃希菌PLG (Plasminogen) ELISA Kit拉丁屬名: coli
馬內菲青霉探針法熒光定量PCR試劑盒供應商Rhesus antibody Rh NEK8 絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶NEK8 規格 0.2ml

Human C-Polypeptide,CP ELISA Kit 人C多肽 96T

Tsukushin 英文名稱： TSK蛋白 0.2ml

CRTR1 英文名稱： CP2相關轉錄抑制因子1 0.1ml

Anti-Doublecortin 雙皮質素Multi-class antibodies規格： 0.1ml

兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒英文名稱：Rabbit cardiac troponin Ⅰ,cTn-ⅠELISA Kit特價促銷

兔心肌特異性肌鈣蛋白T(c)ELISA試劑盒 英文名稱：Rabbit cardiac isoform of Tropnin T,c ELISA Kit進口/原裝

CA50 英文名稱： 上皮類癌相關抗原 0.1ml

Anti-Phospho-PEA15 (Ser116) 磷酸化星形膠質細胞PEA15Multi-class antibodies規格： 0.1ml

CNX(Human calnexin) ELISA Kit 人鈣聯蛋白Multi-class antibodies規格： 48T

Anti-Phospho-PNK1 (Ser114/Thr118) 磷酸化多聚合苷酸激酶3磷酸化酶Multi-class antibodies規格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh HER2 receptor(1A4) HER2受體單克隆 規格 0.1ml

LPA(Mouse L-phenylalanine) ELISA Kit 小鼠苯丙酸 96T

PHOX2B 英文名稱： 神經母細胞瘤蛋白PHOX2B 0.2ml

人EB病毒IgM(EBv IgM)ELISA試劑盒英文名稱：Human epstein-barr virus IgM，EBv IgM ELISA Kit特價供應

人EJ/抗甘氨酰tRNA合成酶(EJ/GlyRS)ELISA試劑盒 英文名稱：Human anti-EJ-antibody，EJ/GlyRS ELISA Kit進口/原裝

IL-12R Beta2/IL12RB2 peptide 白細胞介素-12受體β2抗原Multi-class antibodies規格： 0.5mg

Anti-Acinus AcinusMulti-class antibodies規格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-CDKN1B/P27kip1 (Ser178) 磷酸化P27/周期素依賴激酶抑制劑 規格 0.1ml

狗IgG 干粉 10mg/50mg 國產

WDR23 英文名稱： WDR23蛋白 0.2ml

CHD6 英文名稱： ATP依賴的解旋酶CHD6 0.1ml

Anti-VWCE VWCEMulti-class antibodies規格： 0.2ml

PDGF-BB(Human Platelet-Derived Growth Factor-BB) ELISA kit 人血小板衍生生長因子BBMulti-class antibodies規格： 48T

Anti-Gastrin 胃泌素/蛙皮素Multi-class antibodies規格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Mouse Anti-human IgG(3D3)/Cy5.5 Cy5.5標記的鼠抗人IgG單克隆 規格 0.1ml

Human similar to RIKEN cDNA 2610307008 gene ELISA Kit 人類似RIKEN cDNA 2610307008 基因 96T

RNF150 英文名稱： 環指蛋白150 0.2ml