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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3915
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-18
- 更新日期： 2025-04-29
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3915 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
野牛奧斯特線蟲(chóng)探針?lè)晒舛縋CR試劑盒說(shuō)明書(shū) | Ostertagia bisonis | LZR3915 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
鏈霉菌屬SIGLEC3 (Sialic Acid Binding Ig Like Lectin 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces sp.
枯草芽孢桿菌CFTR (Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis
侵蝕侏儒囊菌MIP-5 (Macrophage Inflammatory Protein 5) ELISA Kit 拉丁屬名: Nannocystis exedens
釀酒酵母CA1 (Carbonic Anhydrase I) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
地衣芽孢桿菌Cx (Connexin) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus licheniformis
枯草芽孢桿菌MIP-3β/ELC/CCL19 (Macrophage Inflammatory Protein 3β) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis
蜂房類芽孢桿菌C-P (C-Peptide) ELISA Kit拉丁屬名: Paenibacillus alvei
紅法夫酵母SOD3 (Superoxide Dismutase 3, Extracellular) ELISA Kit拉丁屬名: Phaffia rhodozyma
CitricoccusGDF2 (Growth Differentiation Factor 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Citricoccus zhacaiensis
根瘤菌屬PRELP (Proline Arginine Rich End Leucine Rich Repeat Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizobium alkalisoli
沙針擬盤(pán)多毛孢NOX5 (Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 5) ELISA Kit拉丁屬名: Pestalotiopsis osyridis
傘菌假單胞菌GAL4 (Galectin 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudomonas agarici
釀酒酵母CLA (Collagen Autoantibody) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
枯草芽孢桿菌枯草亞種NA/NE (Noradrenaline/Norepinephrine) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis subsp. subtilis
炭黑曲霉CDK2 (Cyclin Dependent Kinase 2) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus carbonarius
野牛奧斯特線蟲(chóng)探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒說(shuō)明書(shū)Apolipoprotein E 英文名稱： 載脂蛋白E 0.1ml
Anti-phospho-Bim(Ser69) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化細(xì)胞死亡調(diào)解子IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
IL-3(Mouse Interleukin 3) ELISA Kit 小鼠白介素3Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-CCP/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗瓜氨酸環(huán)肽IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh EDG3 內(nèi)皮分化型G蛋白偶聯(lián)受體3 規(guī)格 0.2ml
I CTP ELISA Kit 大鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽 96T
MRP8+MRP14 英文名稱： 多藥耐藥相關(guān)蛋白8/9/14 0.2ml
C9ORF43 英文名稱： 9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框43 0.2ml
Anti-OAT-3 陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-3Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
iNOS(Human inducible nitric oxide synthase) ELISA KIT 人誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-OAT-1/SLC22A6 陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh IFI78/MX1 干擾素誘導(dǎo)蛋白P78 規(guī)格 0.1ml
GP-MM(Mouse Glycogen phosphorylase MM)ELISA Kit 小鼠糖原磷酸化酶同工酶MM 96T
PCDHA8 英文名稱： 原鈣粘附蛋白α8 0.2ml
beta-Amyloid(25-35) 英文名稱： β淀粉樣肽(25-35) 0.1ml
Anti-Tie2 生成素受體2Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
sPLA2 (Rat secreted phospholipase A2,sPLA2) ELISA Kit 大鼠分泌型磷脂酶A2Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Stra8 視黃酸激活基因8Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat Anti-human IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的羊抗人IgG 規(guī)格 0.1ml
LDL-IC ELISA Kit 大鼠免疫復(fù)合物 96T
NCKAP1L 英文名稱： 造血蛋白1 0.2ml
CFDP1 英文名稱： 顱面部發(fā)育蛋白1 0.2ml
Anti-MMP-15 基質(zhì)金屬蛋白酶-15Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
PWM(Human poke* mitogen) ELISA Kit 人美洲商陸素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-MBP 髓鞘堿性蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh KAT4 細(xì)胞周期基因1蛋白 規(guī)格 0.1ml
CYT Ab(Human Cysticercosis antybody) ELISA Kit 人囊蟲(chóng)病 96T
PHKG2 英文名稱： 磷酸化酶激酶γ2 0.2ml
