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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3995
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-18
- 更新日期： 2025-01-10
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3995 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
變形桿菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | Proteus spp. | LZR3995 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
釀酒酵母SYK (Spleen Tyrosine Kinase) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
巨大芽孢桿菌 ATP (Thymidine Phosphorylase) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus megaterium A de Bary
嗜松青霉GATA3 (GATA Binding Protein 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Penicillium pinophilum
腐皮鐮孢GPLD1 (Glycosylphosphatidylinositol Specific Phospholipase D1) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
韓國海桿狀菌COL9α3 (Collagen Type IX Alpha 3) ELISA Kit拉丁屬名: Marinobacter koreensis
山原申氏菌LCN2 (Lipocalin 2) ELISA Kit拉丁屬名: Shinella yambaruensis
泡囊短波單胞菌LTβR (Lymphotoxin Beta Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Brevundimonas vesicularis
黃色刺孢鏈霉菌CA125 (Carbohydrate Antigen 125) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces flavospinosporus
孟氏假單胞菌CKMT1B (Creatine Kinase, Mitochondrial 1B ) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudomonas mandelii
Cecembia sp.PDGFC (Platelet Derived Growth Factor C) ELISA Kit 拉丁屬名: Cecembia sp.
大腸埃希氏菌SDH (Sorbitol Dehydrogenase) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli
球孢白僵菌PLCγ2 (Phospholipase C Gamma 2, Phosphatidylinositol Specific) ELISA Kit用途: 昆蟲防治研究
環(huán)圈鏈霉菌MCP-4/CCL13 (Monocyte Chemotactic Protein 4) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces anulatus
球孢白僵菌ERK (Extracellular Signal Regulated Kinase) ELISA Kit用途: 生物防治
斑形葉點(diǎn)霉FⅫa (Activated Coagulation Factor Ⅻ) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
變形桿菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒說明書phospho-AMPK alpha 2 (Ser491) 英文名稱： 磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2 0.1ml
Anti-ARIP2B/FITC 熒光素標(biāo)記激活素受體2B/激活素受體相互作用蛋白2bIgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
MYS(Mouse Myosin) ELISA Kit 小鼠肌球蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-cdc25A /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠細(xì)胞分裂周期蛋白25IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Donkey Anti-Guinea pig IgG/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記的驢抗豚鼠IgG 規(guī)格 0.1ml
FSH ELISA Kit 魚促卵泡素 96T
MrpL12 英文名稱： 線粒體核糖體蛋白L12 0.1ml
Calpain 12 英文名稱： 鈣激活蛋白酶12 0.2ml
Anti-Ntn1 軸突導(dǎo)向因子1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
M2-PK (Human Pyruvate Kinase) ELISA Kit 人丙酮酸激酶M2型同工酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Phospho-NuMA (Ser395) 磷酸化核有絲分裂器NuMA蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh IFN gamma(F2E4) γ-干擾素單克隆 規(guī)格 0.1ml
CRP ELISA Kit 大鼠C反應(yīng)蛋白 96T
PCDHAC1 英文名稱： 原鈣粘蛋白1 0.2ml
大鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒英文名稱：Rat Interleukin 1 receptor antagonist, IL-1ra ELISA Kit進(jìn)口/原裝
GRB2/ASH peptide 生長因子受體結(jié)合蛋白2抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Oct4 Oct4 鼠單抗 (FITC) Human
Rhesus antibody Rh phospho-CstF64(Ser498) 磷酸化細(xì)胞分裂相關(guān)蛋白CSTF64 規(guī)格 0.1ml
染色液 100ml 自產(chǎn)
ZNF704 英文名稱： 鋅指蛋白704 0.2ml
DCUN1D2 英文名稱： DCN1樣蛋白2 0.2ml
CHURC1 英文名稱： 神經(jīng)誘導(dǎo)胚胎發(fā)育相關(guān)蛋白Churchill 0.2ml
Anti-GABABR1 gamma氨基丁酸B型受體1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
HGF 小鼠肝細(xì)胞生長因子Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-FGF8/HBGF-8 成纖維細(xì)胞生長因子8Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Mouse Anti-Rabbit IgM/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的小鼠抗兔IgM 規(guī)格 0.1ml
ST(Human Serotonin) ELISA Kit 人血清素/血清胺 96T
SPATA3 英文名稱： 生成相關(guān)蛋白3 0.2ml
