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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3988
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-18
- 更新日期： 2025-01-10
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3988 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
黑色普雷沃菌探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商 | Prevotella melaninogenica | LZR3988 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
毛霉屬CYTH1 (Cytohesin 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Mucor sp.
皺褶莫氏黑粉菌CDK7 (Cyclin Dependent Kinase 7) ELISA Kit拉丁屬名: Moesziomyces rugulosus
淺黃色假單胞菌BAFF/CD257/TNFSF13B (B-Cell Activating Factor) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas lurida
植物乳桿菌PC4 (Positive Cofactor 4) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus plantarum
燕麥?zhǔn)人峋鞴蟻喎N*COMP (Cartilage Oligomeric Matrix Protein) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
大果毛殼IL-9 (Interleukin 9) ELISA Kit拉丁屬名: Chaetomium megalocarpum
ActinomonosporaCOL6α3 (Collagen Type VI Alpha 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Actinomonospora sp.
炭疽芽胞桿菌AMY1 (Amylase Alpha 1, Salivary) ELISA Kit拉丁屬名: anthracis
殺鏈霉菌NUP107 (Nucleoporin 107kDa) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces tubercidicus
大腸埃希菌ATA (Angiotensinase A) ELISA Kit拉丁屬名: coli
費(fèi)氏中華根瘤菌EGR3 (Early Growth Response Protein 3) ELISA Kit 用途: 能與我國(guó)栽培大豆共生固氮
毒三素鏈霉菌OVA sIgG (Ovalbumin Specific IgG) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces toxytricini
香氣紅冬孢鎖擲孢酵母bFGF/FGF2 (Basic Fibroblast Growth Factor) ELISA Kit 拉丁屬名: Rhodosporidiobolus odoratus
阿薩希絲孢酵母CD59 (Protectin) ELISA Kit 拉丁屬名: Trichosporon asahii
猶他游動(dòng)放線菌TRF (Transferrin) ELISA Kit拉丁屬名: Actinoplanes utahensis
黑色普雷沃菌探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商AXL 英文名稱： 粘附相關(guān)激酶 0.1ml
Anti-FLASH/CASP8AP2/FITC 熒光素標(biāo)記半胱氨酸蛋白酶8相關(guān)蛋白2IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Ach ELISA Kit 大鼠乙酰膽堿Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-ACE2/FITC 熒光素標(biāo)記緊張素轉(zhuǎn)換酶2IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Fibrinogen gamma chain 人纖維蛋白原γ鏈 規(guī)格 0.2ml
PP(Mouse Protein Phosphatase) ELISA Kit 小鼠蛋白磷酸酶 96T
MMP24 英文名稱： 基質(zhì)金屬蛋白酶-24 0.1ml
Calcyphosine 2 英文名稱： 鈣磷蛋白2 0.2ml
Anti-NRF-1 核呼吸因子-1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
LEPR(Human Leptin Receptor) ELISA Kit 人瘦素受體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-phospho-P53 (Ser33) 磷酸化抑制基因P53Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh HSP27/HspB1/HSP25 熱休克蛋白27 規(guī)格 0.1ml
ANNA-2/Ri(Human neuronal nuclear autoantibody) ELISA Kit 人抗神經(jīng)元核2型/抗Ri 96T
Parkin 英文名稱： 帕金蛋白 0.1ml
小鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse Nerve growth factor,NGF ELISA Kit 特價(jià)供應(yīng)
小鼠神經(jīng)絲蛋白(NF)ELISA試劑盒 英文名稱：Mouse neurofilament protein,NF ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
COX-2(human) 人素氧化環(huán)化酶2Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-CD150/SLAM 信號(hào)淋巴細(xì)胞活化分子CD150Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh NIPA 間變性激酶核相互作用伴侶蛋白 規(guī)格 0.2ml
Human Calreticulin,CRT ELISA Kit 人鈣網(wǎng)蛋白 96T
TRIB2 英文名稱： MAPK調(diào)控蛋白TRB2 0.2ml
CHRNA6 英文名稱： 型乙酰膽堿受體α6/AChRα6 0.2ml
Anti-E.coli O6 大腸桿菌埃希桿菌O6(腸致病性大腸桿菌O6)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
CSF(Human colony-stimulating factor) ELISA Kit 人集落刺激因子Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-phospho-GAP43(Ser41) 磷酸化神經(jīng)生長(zhǎng)相關(guān)蛋白43Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Mouse Anti-human IgG(3D3)/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的鼠抗人IgG單克隆 規(guī)格 0.1ml
CLEC4E(Human C-type lectin domain family 4 member e) ELISA Kit 人C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族4成員E 96T
phospho-RUNX3(Ser338) 英文名稱： 磷酸化Runx3 0.1ml
