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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3986
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-18
- 更新日期： 2025-01-10
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3986 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
卟啉單胞菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | Porphyromonas spp. | LZR3986 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
枯草芽孢桿菌PKP1 (Plakophilin 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis
大腸埃希氏菌GP-73 (Golgi Protein 73) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli
蘑菇輪枝孢FcεR I (Receptor I for the Fc Fragment of IgE) ELISA Kit拉丁屬名: Lecanicillium psalliotae
熱帶假絲酵母CYTIP (Cytohesin Interacting Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Candida tropicalis
枯草芽孢桿菌IL-3 (Interleukin 3) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
Bacillus aryabhattai Shivaji et al. PP (Placental Protein) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
短小芽孢桿菌UPP1 (Uridine Phosphorylase 1) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus pumilus
齒孢青霉Gal-6S (Galactose-6-Sulphatase) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium daleae
病毒RT-nPCR檢測(cè)試劑盒CG (Cryoglobulin) ELISA Kit規(guī)格: 24頭份
大腸埃希氏菌NPYR1 (Neuropeptide Y Receptor Y1) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli
黑綠青霉ELN (Elastin) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium atranemtosum
茶褐斑盤多毛孢GPC1 (Glypican 1) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
熒光假單胞菌同型小種GTNNI2 (Troponin I Type 2, Fast Skeletal) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
東方伊薩酵母IL-23 p40(Interleukin 23) ELISA Kit拉丁屬名: Issatchenkia orientalis
暗黑橄欖色鏈霉菌CSF (Colony Stimulating Factor) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
卟啉單胞菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格XPNPEP2 Kit Human 人 XPNPEP2 ELISA配對(duì) ELISA
TWSG1 英文名稱： 扭轉(zhuǎn)原腸胚形成同源蛋白1 0.2ml
CLDND1 英文名稱： 膜蛋白CLDND1 0.1ml
Anti-Sialic14 唾液酸結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集素14Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Yellow fever virus envelope glycoprotein E 英文名稱： 黃熱病毒包膜糖蛋白 0.1ml
轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子–β受體2 Anti-TGF-βR 2 0.1ml
Anti-TLR11/FITC 熒光素標(biāo)記Toll樣受體11IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Calcyon 英文名稱： 多巴胺D1受體相互作用蛋白 0.2ml
Anti-phospho-P70 S6 Kinase beta (Ser371) 磷酸化核糖體S6蛋白激酶Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
C3b(Human Complement fragment 3b) ELISA Kit 人補(bǔ)體片斷3bMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
anti-RAP1A 抗Rap1AMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh HAND1 和神經(jīng)嵴衍生蛋白1 規(guī)格 0.2ml
Alpha2-AP(Mouse Alpha2-Antiplasmin) ELISA Kit 小鼠α2抗纖溶酶 96T
Plectin 英文名稱： 網(wǎng)蛋白 0.2ml
DRGX 英文名稱： 背根神經(jīng)節(jié)同源蛋白DRGX 0.2ml
PPM1A PPM1A / PP2C-alpha 鼠單抗 (FITC) Human
EPHA10 英文名稱： 酪酸蛋白激酶受體A10 0.1ml
惡性特異性生長(zhǎng)因子 Anti-TSGF 0.1ml
Anti-TRF/FITC 熒光素標(biāo)記抗轉(zhuǎn)鐵蛋白IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-IRF3(Ser386) 磷酸化干擾素調(diào)節(jié)因子3 規(guī)格 0.1ml
SM-MHC(Cardiac myosin heavy chain) 心肌肌凝蛋白多肽Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
CHRNA3 英文名稱： 型乙酰膽堿受體α3 0.2ml
Anti-phospho-FAK (Tyr577) 磷酸化粘著斑激酶Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Fc Epsilon R II /CD23(Human Receptor II for the Fc region of immunoglobulin E,Fc Epsilon R II ) ELISA Kit 人免疫球蛋白E Fc段受體ⅡMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-FOXM1/HFH 11 叉頭蛋白M1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Mouse Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的小鼠抗兔IgG 規(guī)格 0.1ml
AD(Human amiodarone) ELISA Kit 人乙胺呋酮 96T
SHC3 英文名稱： SH2結(jié)構(gòu)域蛋白C3 0.2ml
