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PCR反應鑒定——PCR反應條件:

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析，提供實驗報告給您。

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因，較佳地管家基因，優選地為RPPH1的擴增區域，其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

以下列是公司正在熱銷的產品：

核果尾孢CKLF (Chemokine Like Factor) ELISA Kit 拉丁屬名: Mycosphaerella cerasella Aderh.

新月彎孢GDF5 (Growth Differentiation Factor 5) ELISA Kit 用途: 研究

亞美尼亞小脆柄菇ATF6 (Activating Transcription Factor 6) ELISA Kit拉丁屬名: Psathyrella armeniaca Pegler

潮濕學校擬諾卡氏菌PICP (Procollagen I C-terminal Propeptide) ELISA Kit 拉丁屬名: Nocardiopsis umidischolae

蒼白桿菌GAL1 (Galectin 1 ) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

肉糜  牛源性成分（定性）MMP-12 (Matrix Metalloproteinase 12) ELISA Kit拉丁屬名: 肉糜  牛源性成分（定性）

島生異擔子菌NTRK3 (Neurotrophic Tyrosine Kinase Receptor Type 3 ) ELISA Kit 拉丁屬名: Heterobasidion insulare

枯草芽胞桿菌CCND3 (Cyclin-D3) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

灰葡萄孢（灰霉病菌）NTXI (Cross Linked N-telopeptide of Type I Collagen) ELISA Kit用途: 教學科研

毛殼ATM (Ataxia Telangiectasia Mutated) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

紅緣層孔菌 PDGFRL (Platelet Derived Growth Factor Receptor Like Protein) ELISA Kit 用途: 藥用

馬泰勒蟲（青海湟源株）GC (Glycocalicin) ELISA Kit拉丁屬名: equi

絨毛栓菌GATA5 (GATA Binding Protein 5) ELISA Kit 拉丁屬名: Trametes pubescens

短短芽孢桿菌FDP (Fibrinogen Degradation Product) ELISA Kit拉丁屬名: Brevibacillus brevis

枯草芽孢桿菌TAFI (Thrombin Activatable Fibrinolysis Inhibitor) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis
卡氏肺孢子蟲探針法熒光定量PCR試劑盒供應商人內皮細胞生長因子受體1(VEGFR-1/Flt1)ELISA試劑盒英文名稱：Human Vascuoar endothelial cell growth factor receptor 1,VEGFR-1/Flt1 ELISA Kit 進口/原裝

人內皮細胞生長因子受體3(VEGFR-3/Flt-4)ELISA試劑盒英文名稱：Human Vascuoar endothelial cell growth factor receptor 2,VEGFR-2/Flk-1 ELISA Kit 進口/分裝

人內皮細胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒 英文名稱：Human Vascuolar cell adhesion molecule 1，VCAM-1 ELISA Kit 特價促銷

IgA ELISA Kit 大鼠免疫球蛋白AMulti-class antibodies規格： 48T

Anti- Beta-Actin/FITC 熒光素標記β-肌動蛋白IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh FGF3/Oncogene INT2 纖維母細胞生長因子3 規格 0.1ml

Alpha1-MG(Mouse Alpha1-microglobulin) ELISA Kit 小鼠α1微球蛋白 96T

Cadherin 10 英文名稱： 鈣粘附分子10 0.2ml

Anti-Integrin alpha V/CD51 整合素αVMulti-class antibodies規格： 0.2ml

LTA(Human lipoteichoic acids) ELISA Kit 人脂磷壁酸Multi-class antibodies規格： 48T

Anti-PEG10 高表達基因Multi-class antibodies規格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh HIV p55+NP7 病毒 規格 0.2ml

PI Ab-IgG/IgM(Mouse phosphatidylinositol antibody IgG/IgM) ELISA Kit 小鼠磷脂酰肌醇IgG/IgM 96T

PMFBP1 英文名稱： 多胺調制因子結合蛋白1 0.2ml

BIN1 英文名稱： 橋連整合因子蛋白 0.1ml

Anti-TFF2 三葉肽因子2Multi-class antibodies規格： 0.1ml

Human latent membrane protein-1,LMP-1 ELISA Kit 人潛伏膜蛋白1Multi-class antibodies規格： 48T

Anti-Slug 鋅指轉錄因子SlugMulti-class antibodies規格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Goat Anti-rabbit IgG/PE PE標記的羊抗兔IgG 規格 0.1ml

AQP-1(Mouse Aquaporin 1) ELISA Kit 小鼠水通道蛋白1 96T

NAT8L 英文名稱： N-乙酰轉移酶8樣蛋白 0.2ml

CHMP2B 英文名稱： 染色質修飾蛋白2B 0.2ml

Anti-Phospho-p73 (Tyr99) 磷酸化P73抑制基因Multi-class antibodies規格： 0.1ml

HSP-90(Human Heat Shock Protein 90) ELISA Kit 人熱休克蛋白90Multi-class antibodies規格： 48T

Anti-PACAP R1/VIP receptor-I 腺苷酸環化酶激活肽受體-IMulti-class antibodies規格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh HRAS+KRAS 轉化蛋白p21(原癌基因H-ras) 規格 0.2ml

LIFR ELISA Kit 大鼠抑制因子受體 96T

PHAP1 英文名稱： 蛋白磷酸酶2A抑制劑1 0.2ml