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客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。

PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質粒載體為本領域常規(guī)質粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產品：

成團泛菌ADIPOR1 (Adiponectin Receptor 1) ELISA Kit拉丁屬名: Pantoea agglomerans

栗疫菌FOXP3 (Forkhead Box Protein P3) ELISA Kit 拉丁屬名: Cryphonectria parasitica

釀酒酵母FBG (Fibrinogen) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

香菇TBP2 (Thioredoxin Binding Protein 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Lentinula edodes

ATCC 14028CNX (Calnexin) ELISA Kit拉丁屬名: Salmonella enterica subsp. enterica serovar Typhimurium

土生類諾卡氏菌DA (Dopamine) ELISA Kit拉丁屬名: Nocardioides terrigena

葡萄糖桿菌屬CS (Chondroitin Sulfate) ELISA Kit拉丁屬名: Gluconobacter cerinus

桔青霉GEF (Guanylate Exchange Factor) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium citrinum

黃色單胞菌CCL4L1 (Chemokine C-C-Motif Ligand 4 Like Protein 1) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

美澳型核果褐腐病菌ACE (Angiotensin I Converting Enzyme) ELISA Kit拉丁屬名: Monilinia fructicola

釀酒酵母PTX 3/TSG-14 (Pentraxin 3, Long) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

Glarea lozoyensisTGM2 (Transglutaminase 2, Tissue) ELISA Kit拉丁屬名: Glarea lozoyensis

釀酒酵母CK-LMW (Cytokeratin Low Molecular Weight) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae

紫產色鏈孢囊菌CD30L (Cluster of Differentiation 30 Lligand) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptosporangium violaceochromogenes

鑲邊鏈霉菌PTN (Pleiotrophin) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces fimicarius
產紫青霉探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格Anti-ASPP1 p53凋亡刺激蛋白1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

人銅藍蛋白(CP/CER)ELISA試劑盒英文名稱：Human Ceruloplasmin,CP/CER ELISA Kit特價供應

人透明質酸(HA)ELISA試劑盒英文名稱：Human Hyaluronic acid，HA ELISA Kit進口/原裝

人透明質酸結合蛋白(HABP)ELISA試劑盒英文名稱：Human Hya]uronate binding protein,HABP ELISA Kit進口/原裝

人透明質酸酶(HAase)ELISA試劑盒 英文名稱：Human Hyaluronidase，HAase ELISA Kit進口/分裝

人褪黑素(MT)ELISA試劑盒英文名稱：Human Melatonin，MT ELISA Kit特價供應

P-selectin P選擇素抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

CA7 英文名稱： 碳酸酐酶7 0.2ml

Anti-Langerin/CD207 白細胞分化抗原CD207Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

LPS(Human Lipopolysaccharides) ELISA Kit 人脂多糖/內毒素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-CMV/HCMV PP65/HHV5 PP65 巨細胞病毒PP65/CMV低基質磷脂蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh KAT3B/Ep300 轉錄接頭蛋白EP300 規(guī)格 0.2ml

Human Diphtheria antibody ELISA Kit 人白喉 96T

PPIL1 英文名稱： 親環(huán)素相關蛋白1 0.2ml

DUSP2 英文名稱： 雙特異性磷酸酶2 0.2ml

Anti-5-LOX 5-脂氧合酶Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

ET-1 英文名稱： 內皮素-1 0.2ml

神經(jīng)生長因子-β Anti-NGF-β 0.1ml

Anti-PILR Beta/FDFACT/FITC 熒光素標記Ⅱ型成對免疫球蛋白樣受體β蛋白IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-p70 S6 Kinase Beta 2 (Tyr389) 磷酸化核糖體S6蛋白激酶β2 規(guī)格 0.1ml

5-HTR3(5-hydroxytryptamine (serotonin) receptor 3a) 5-羥色胺受體3抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

CHD8 英文名稱： ATP依賴的解旋酶CHD8 0.1ml

Anti-HBeAg(2) 人e抗原單克隆(2)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

IGFBP-3(Human insulin-like growth factors binding protein 3) ELISA Kit 人樣生長因子結合蛋白3Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-GRM1 促代謝型谷氨酸受體1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh MOBKL2C Mob1同源蛋白MOBKL2C 規(guī)格 0.2ml

AAA(Human Anti-adrenocortical antibody) ELISA Kit 人抗腎上腺皮質 96T

RUNX1T1 英文名稱： 周期素D相關蛋白 0.1ml