- 品牌:聯祖
- 產地:進口、國產
- 貨號:LZR3940
- 價格: ¥3800/盒
- 發布日期: 2020-11-18
- 更新日期: 2025-01-10
產地 | 進口、國產 |
品牌 | 聯祖 |
貨號 | LZR3940 |
用途 | 公司產品僅用于科研 |
包裝規格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
巴斯德氏桿菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒供應商 | Pasteurella spp. | LZR3940 |
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環步驟 | 溫度 | 時間 | 循環數 |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產品:
皺孢鏈霉菌RNASEN (Ribonuclease III, Nuclear) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces scabrisporus
普通變形桿菌MRP1 (Multidrug Resistance Associated Protein 1) ELISA Kit拉丁屬名: vulgaris
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釀酒酵母NP (Nandrolone Phenylpropionate) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
淡黃濕傘CDNF (Cerebral Dopamine Neurotrophic Factor) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
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Anti-AMPK beta-1(phospho Ser108) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
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IL1Ra ELISA Kit 大鼠白介素1受體拮抗劑 96T
MHC Class II 英文名稱: 組織相容性復合體β 0.1ml
CA I 英文名稱: 碳酸酐酶1 0.2ml
Anti-NGB 腦紅蛋白/神紅蛋白Multi-class antibodies規格: 0.1ml
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Anti-phospho-c-Raf(Ser338/Tyr340) 磷酸化原癌基因c-RafMulti-class antibodies規格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh HAGHL 羥基酰谷胱甘肽水解酶樣蛋白 規格 0.2ml
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Rhesus antibody Rh Phospho-MAP2 (Thr1620/1623) 磷酸化微管相關蛋白2 規格 0.1ml
Nociceptin receptor 孤菲肽受體(痛敏肽受體)(抗原)Multi-class antibodies規格: 0.5mg
人Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA試劑盒英文名稱:Human C-telopeptide of type Ⅰ collagen,CTX-Ⅰ ELISA Kit特價促銷
人Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)ELISA試劑盒 英文名稱:Human cross linked N-telopeptide of type Ⅰ collagen,NTX ELISA Kit特價供應
CHCHD3 英文名稱: 卷曲螺旋結構域蛋白CHCHD3 0.1ml
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Anti-ICAD/DFF-45 Beta Caspase激活的脫氧核糖核酸酶抑制劑Multi-class antibodies規格: 0.1ml
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RNF213 英文名稱: 環指蛋白213 0.1ml