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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3932
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-18
- 更新日期： 2025-01-10
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3932 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
副球孢子菌探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商 | Paracoccidioides brasiliensis | LZR3932 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
鏈霉菌C5 (Complement Component 5) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces sp.
芽孢桿菌CA153 (Carbohydrate Antigen 153) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
茯苓CKMT1B (Creatine Kinase, Mitochondrial 1B ) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌HSP-60/HSPD1 (Heat Shock Protein 60) ELISA Kit拉丁屬名: Stenotrophomonas maltophilia
戊糖乳桿菌ES (Endostatin) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus pentosus
側(cè)耳Bcl-2 (B-cell Leukemia/Lymphoma 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Pleurotus sp.
嗜冷德沃斯氏菌TGF-β3 (Transforming Growth Factor β3) ELISA Kit 拉丁屬名: Devosia psychrophila
釀酒酵母OCT (Ornithine Carbamoyl Transferase) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
長枝木霉PRL (Prolactin) ELISA Kit拉丁屬名: Trichoderma longibrachiatum
芽胞桿菌LCN1 (Lipocalin 1) ELISA Kit用途: 教學(xué)科研
*蛹蟲草SCTR (Secretin Receptor) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
產(chǎn)吲哚薩頓菌Grb7 (Growth Factor Receptor Bound Protein 7) ELISA Kit 拉丁屬名: Suttonella indologenes
施氏假單胞菌CRN (Corin) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas stutzeri
芽孢桿菌LTA4H (Leukotriene A4 Hydrolase) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus atrophaeus
嗜鹽鹽單胞菌MAGE (Melanoma-associated Antigen) ELISA Kit拉丁屬名: Halomonas halophila
副球孢子菌探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商Amisyn 英文名稱： 突觸融合結(jié)合蛋白6 0.2ml
Anti-BLNK/B-cell linker protein /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠T淋巴細(xì)胞連接蛋白IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
TNFsR- II ELISA Kit 大鼠壞死因子可溶性受體ⅡMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Annexin III /FITC 熒光素標(biāo)記膜粘連蛋白 ⅢIgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh FANCF 范可尼相關(guān)蛋白F 規(guī)格 0.2ml
ICAM-3/CD50(Human intercellular adhesion molecule 3) ELISA Kit 人細(xì)胞間粘附分子3 96T
MFAP3L 英文名稱： 微絲相關(guān)蛋白3樣 0.1ml
C9orf84 英文名稱： 9號(hào)染色體開放閱讀框84 0.2ml
Anti-PNK1/PNKP 多聚合苷酸激酶3磷酸化酶Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
ADAM9(Human A Disintegrin And Metalloprotease 9) ELISA Kit 人解整合素樣金屬蛋白酶9Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-MSK1 有絲分裂原和應(yīng)激活化型蛋白激酶1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Integrin alpha 2/CD49b 整合素α2 規(guī)格 0.1ml
S100A8(human S100 calcium binding protein A8/calgranulin A) ELISA Kit 人S100鈣結(jié)合蛋白A8/鈣粒蛋白A 96T
P311 protein 英文名稱： 神經(jīng)再生相關(guān)蛋白 0.1ml
Human Cartilage glycoprotein 39,HC gp-39 ELISA Kit 人軟骨糖蛋白39 96T
TRIM35 英文名稱： TRIM35蛋白 0.1ml
CENPQ 英文名稱： 著絲粒蛋白Q 0.1ml
Anti-C-SKI/v-SKI C-SKIMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
小鼠腦紅蛋白(NGB)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse Neuroglobin,NGB ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
小鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse Brain derived neurotrophic facor,BDNF ELISA Kit特價(jià)促銷
小鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒 英文名稱：Mouse Brain derived neurotrophic facor,BDNF ELISA Kit特價(jià)促銷
CH25H 英文名稱： 膽固醇25羥化酶 0.2ml
Anti-ELK1 細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子ELK1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Collagen I 大鼠I型膠原Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-DISC1 (CT) DISC1 C端Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh NDRG4 基因NDRG4 規(guī)格 0.2ml
Human Immunoglobulin G,IgG ELISA Kit 人免疫球蛋白G 96T
Phospho-SHIP1 (Tyr1020) 英文名稱： 磷酸化SH2結(jié)構(gòu)含磷酸肌醇SHIP1 0.1ml
