- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號(hào):LZR3926
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-18
- 更新日期: 2025-01-10
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號(hào) | LZR3926 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
(同病毒)綿羊病毒探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | Ovine Ecthyma Virus(Orf) | LZR3926 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
克雷伯氏菌REG3α (Regenerating Islet Derived Protein 3 Alpha) ELISA Kit 拉丁屬名: Klebsiella pneumoniae
多粘類芽胞桿菌Flt3 (FMS Like Tyrosine Kinase 3) ELISA Kit用途: 產(chǎn)β-淀粉酶
間座殼屬BCAN (Brevican) ELISA Kit 拉丁屬名: Diaporthe sp.
白地霉MMP-24 (Matrix Metalloproteinase 24) ELISA Kit 拉丁屬名: Geotrichum candidum
plenti sgRNA(MS2)_puro(Plasmid#73795)pSAMca089-p FUGW-U6-BsmBl-sg RNA009-EF1α-Puro-WPREMMP-25 (Matrix Metalloproteinase 25) ELISA Kit拉丁屬名: 宿主:DH5α,BL21
釀酒酵母CAPA (Cytotoxin Associated Protein A) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
壯觀絲衣霉VEGF-D (Vascular Endothelial Growth Factor D) ELISA Kit 拉丁屬名: Byssochlamys spectabilis
蛛絲細(xì)薄菌CYP7A1 (Cytochrome P450 7A1) ELISA Kit 拉丁屬名: Athelia arachnoidea
高山被孢霉CFH (Complement Factor H) ELISA Kit拉丁屬名: Mortierella alpina
海床游動(dòng)微菌TPA (Tissue Polypeptide Antigen) ELISA Kit拉丁屬名: Planomicrobium okeanokoites
蠟狀芽孢桿菌HJV/HFE2 (Hemojuvelin/Hemochromatosis Type 2) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus cereus
大腸桿菌SDF2L1 (Stromal Cell Derived Factor 2 Like Protein 1) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
黑腐皮殼菌GAP (GTPase Activating Protein) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
印度洋硝酸鹽還原菌Arg (Arginase) ELISA Kit拉丁屬名: Nitratireductor indicus
肯彭貪銅菌FABP5 (Fatty Acid Binding Protein 5, Epidermal ) ELISA Kit拉丁屬名: Cupriavidus campinensis
(同病毒)綿羊病毒探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格ATRN 英文名稱: 吸引素 0.2ml
Anti-SLAMF9/CD2F-10/FITC 熒光素標(biāo)記CD2F-10IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
P-Selectin/CD62P(Mouse P-Selectin) ELISA kit 小鼠P選擇素Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-CD7/FITC 熒光素標(biāo)記抗CD7IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh E3 ubiquitin ligase/RNF218 E3泛素連接酶 規(guī)格 0.2ml
MU IgG 病毒 IgG(間接法二步法)
Mitofusin 2 英文名稱: 線粒體融合蛋白Mfn2 0.1ml
C9orf7 英文名稱: 9號(hào)染色體開放閱讀框7 0.2ml
Anti-Phospho-PLC gamma 1 (Tyr771) 磷酸化磷酯酶Cγ1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
ES-Ab(Human anti-Endostatin antibody) ELISA Kit 人內(nèi)皮抑素Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-phospho-P53 (Ser392) 磷酸化抑制基因P53Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh HSP71 熱休克蛋白71 規(guī)格 0.1ml
HD(Mouse Histone Deacetylase)ELISA Kit 小鼠組織蛋白去乙酰化酶 96T
PAK1 英文名稱: p21激活激酶1 0.1ml
人甘露糖(MN)ELISA試劑盒 英文名稱:Human Mannose,MN ELISA Kit進(jìn)口/原裝
人甘露糖結(jié)合蛋白/甘露糖結(jié)合凝集素(MBP/MBL)ELISA試劑盒 英文名稱:Human Mannma binding protein/mannan binding lectin,MBP/MBL ELISA Kit進(jìn)口/原裝
人甘露糖凝集素受體(MBLR)ELISA試劑盒 英文名稱:Human Mannma binding lectin receptor,MBLR ELISA Kit特價(jià)促銷
人甘露糖受體(MR)ELISA試劑盒 英文名稱:Human mannose receptor,MR ELISA Kit特價(jià)促銷
NAP1 (nucleosome assembly protein 1) 核小體組裝蛋白1(多肽)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-Apelin 脂肪因子ApelinMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Bad(Ser118) 磷酸化相關(guān)死亡促進(jìn)因子 規(guī)格 0.1ml
CGK2 英文名稱: cGMP依賴性蛋白激酶2 0.1ml
Anti-HCV-Core 病毒-C區(qū)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Human P27 protein ELISA Kit 人P27蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-HCG Alpha 人絨毛膜激素α亞基Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh MIP4/CCL18 巨噬細(xì)胞蛋白18 規(guī)格 0.1ml
MLCK(Human myosin light chain kinase) ELISA Kit 人肌球蛋白輕鏈激酶 96T
RBM20 英文名稱: RNA結(jié)合蛋白20 0.1ml