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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
海魚分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒規格
  • 品牌:聯祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:LZR3842
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-17
  • 更新日期: 2025-01-10
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 聯祖
貨號 LZR3842
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產品名稱

英文名稱

貨號

海魚分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒規格

Mycobacterium marinum

LZR3842

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產品:

仁果殼小圓孢菌ANXA5 (Annexin A5) ELISA Kit用途: 植物病原物,為該病防治提供依據

嗜熱脂肪地芽孢桿菌ALDOC (Aldolase C, Fructose Bisphosphate) ELISA Kit拉丁屬名: Geobacillus  stearothermophilus

耐寒短桿菌TP/TXA2R (Thromboxane Receptor) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

黑曲霉SHBG (Sex Hormone Binding Globulin) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus niger

西宮皮生球菌C4BP (C4 Binding Protein) ELISA Kit 拉丁屬名: Dermacoccus nishinomiyaensis

阿魏側耳M-AChR M3 (Muscarinic Acetylcholine Receptor M3) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

枯草芽孢桿菌PRELP (Proline Arginine Rich End Leucine Rich Repeat Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis

蘇云金芽孢桿菌AGA (Anti-Glycolipid Antibody) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

佛雷德里克斯堡假單胞菌ODC (Ornithine Decarboxylase) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudomonas  frederiksbergensis

極單胞菌屬PC/CPG (Choline Phosphoglyceride) ELISA Kit拉丁屬名: Polaromonas  vacuolata

灰略紅鏈霉菌RND1 (Rho Family GTPase 1) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces griseorubens

大腸埃希氏菌IGF1R (Insulin Like Growth Factor 1 Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia  coli

草菇TFR/CD71 (Transferrin Receptor) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

禿裸鏈霉菌EFNA4 (Ephrin A4) ELISA Kit 用途: 產生代謝產物具有抑菌活性

ActinokineosporaTFF2 (Trefoil Factor 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Actinokineospora sp.
海魚分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒規格PSMD6/P44S10  蛋白酶調解因子6抗體柯托苷(2,6-Dihydroxy-4-methoxyphenyl)phenylmethanone對照藥材 分 子 式: C14H12O4 分 子 量: 244.24268

OCEL1  緊密連接蛋白/小分子膠原蛋白OCEL1抗體黑介子苷b-D-Glucopyranose, 1-thio-,1-[N-(sulfooxy)-3-butenimidate], potassium salt (1:1)中藥標準品  分 子 式: C10H16NO9S2-.K+ 分 子 量: 397.46364

ODF3B  外致密纖維蛋白3B抗體乙酸鹽緩沖液(0.05mol/L,pH5.0)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

PGBD1/Cerebral protein 4  腦蛋白4抗體野甘草屬醇1-Naphthalenemethanol,8-(benzoyloxy)- decahydro-5-[(3E)-5-hydroxy-3-methyl-3- pentenyl]-1,4a-dimethyl-6-methylene-,(1R,- 4aR,5S,8R,8aR)- 對照藥材 分 子 式:  分 子 量:

PGBD3  PGBD3蛋白抗體靈芝萜酮二醇Lanosta-7,9(11)-dien-3-one,24,25-dihydroxy-, (24S)-化學標準品 分 子 式: C30H48O3 分 子 量: 456.70032

PGGT1β  香葉烯基轉移酶1β抗體漢黃芩素Wogonin中藥標準品  分 子 式: C16H12O5 分 子 量: 284.26348

MYCBP2  MYC結合蛋白2抗體楊梅素3,5,7-Trihydroxy-2-(3,4,5-trihydroxyphenyl)-4H-chromen-4-one中藥標準品  分 子 式: C15H10O8 分 子 量: 318.2351


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