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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產品展廳
禽結核分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:LZR3830
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-17
  • 更新日期: 2025-01-10
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 聯(lián)祖
貨號 LZR3830
用途 公司產品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產品名稱

英文名稱

貨號

禽結核分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格

Mycobacterium avian

LZR3830

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環(huán)步驟

溫度

時間

循環(huán)數(shù)

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域,其中所述質粒載體為本領域常規(guī)質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產品:

平菇GPX1 (Glutathione Peroxidase 1) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

根際假單胞菌EAR3 (Eosinophil Associated Ribonuclease A family Member 3) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas   rhizosphaerae

地衣芽胞桿菌PHC (Primary Hepatic Carcinoma)ELISA Kit用途: 耐高溫淀粉酶

宇佐美曲霉NUMA1 (Nuclear Mitotic Apparatus Protein 1) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus usamii Sakaguchi et al

黃曲霉PKM2 (Pyruvate Kinase, Muscle) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus flavus

生孢梭菌COL7 (Collagen Type VII) ELISA Kit 拉丁屬名: Clostridium sporogenes

東京根霉ALCAM (Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizopus  tonkinensis

金頂側耳FBL (Fibrillarin) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

谷氨酸棒桿菌TDT (Terminal Deoxynucleotidyl Transferase) ELISA Kit拉丁屬名: Corynebacterium  glutamicum

淡紫青鏈霉菌A-CoA (Acetyl Coenzyme A) ELISA Kit用途: 分類 研究

亞羅克魯維酵母TXLNb (Taxilin Beta) ELISA Kit 拉丁屬名: Kluyveromyces yarrowii

費氏中華根瘤菌NF (Neurofilament) ELISA Kit用途: 產酸,能與我國栽培大豆共生固氮

煙草疫霉OCT4 (Octamer Binding Transcription Factor 4) ELISA Kit拉丁屬名: Phytophthora nicotianae

堀越氏芽孢桿菌snRNP/Sm (Small Nuclear Ribonucleoprotein) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus horikoshii

類芽孢桿菌FABP4 (Fatty Acid-binding Protein 4, Adipocyte) ELISA Kit拉丁屬名: Paenibacillus sp.
禽結核分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格BECN1L1  Bcl-2同源結構域樣蛋白1抗體異紫花前胡內酯Marmesin中藥標準品  分 子 式: C14H14O4 分 子 量: 246.25856

BEND5  BEN結構域蛋白5抗體牛磺鵝脫氧膽酸鈉鹽Sodium taurochenodeoxycholate化學標準品 分 子 式: C26H44NNaO6S 分 子 量: 521.68

phospho-IRF3(Ser386)  磷酸化干擾素調節(jié)因子3抗體甲基小檗堿中藥標準品  分 子 式:  分 子 量:

RNF187  環(huán)指蛋白187抗體風信子素(2-(1-Ethoxyethoxy)ethyl)benzene中藥標準品  分 子 式: C12H18O2 分 子 量: 194.27012

PACRG  麻瘋病和共同調節(jié)蛋白抗體半齒澤蘭素色烯Ethanone,1-(7-hydroxy-2,2-dimethyl-2H-1- benzopyran-6-yl)- 對照藥材 分 子 式: C13H14O3 分 子 量: 218.24846

PJA2/RNF131  環(huán)指蛋白131抗體蕨內酰胺Pterolactam對照藥材 分 子 式: C5H9NO2 分 子 量: 115.13046

MUL1/RNF218  E3泛素連接酶MUL1抗體蒼耳亭2H-Cyclohepta[b]furan-2-one,3,3a,4,7,8,8a-hexahydro-7-methyl-3-methylene-6-(3-oxo-1-buten-1-yl)-,(3aR,7S,8aS)-中藥標準品  分 子 式: C15H18O3 分 子 量: 


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