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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
支原體探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
  • 品牌:聯祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:LZR3875
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-17
  • 更新日期: 2025-01-10
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 聯祖
貨號 LZR3875
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

 

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。

產品名稱

英文名稱

貨號

支原體探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

Mycoplasma pneumoniae

LZR3875


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

以下列是公司正在熱銷的產品:

密叢毛霉CX3CL1 (Chemokine C-X3-C-Motif Ligand) ELISA Kit拉丁屬名: Mucor plumbeus

膠孢GPX3 (Glutathione Peroxidase 3, Plasma) ELISA Kit用途: 植物病原物,用于種群的遺傳學研究和炭疽病害的診斷和防治

籬邊粘褶菌ANG II R1/AGTR1 (Angiotensin II Receptor 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Gloeophyllum sepiarium

叢毛紅曲GOD (Glucose Oxidase) ELISA Kit拉丁屬名: Monascus  pilosus

墻支頂孢TALLA-1 (T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia Antigen) ELISA Kit拉丁屬名: Acremonium murorum

酵母ANEA (Anti-Neutrophil Elastase Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces sp

食酸菌屬PAH (Phenylalanine Hydroxylase) ELISA Kit拉丁屬名: Acidovorax  radicis

假委內瑞拉鏈霉菌SPARCL1 (SPARC Like Protein 1) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces pseudovenezuelae

釀酒酵母CD30L (Cluster of Differentiation 30 Lligand) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

薄層桿菌GNβ1 (G Protein Beta 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Hymenobacter sp.

弗吉尼亞鏈霉菌AP (Aprotinin) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces virginiae

Microbacterium halotoleransGATA3 (GATA Binding Protein 3) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

芽孢桿菌屬TACR3 (Tachykinin Receptor 3) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus sp.  

白僵菌NCAM/CD56 (Neural Cell Adhesion Molecule) ELISA Kit 用途: 害蟲生物防治

奇異球菌GDF1 (Growth Differentiation Factor 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Deinococcus sp.
支原體探針法熒光定量PCR試劑盒說明書KLHL36/C16orf44  Kelch樣蛋白36抗體

C16orf7/ATP-BL   16號染色體開放閱讀框7抗體

APC/Adenomatous Polyposis Coli  腺瘤樣抗體

REF-1/APEX1  多功能DNA修復酶抗體

C16orf48  16號染色體開放閱讀框48抗體

phospho-ATG3 (Tyr18)  磷酸化自噬相關蛋白3抗體

C16orf57  16號染色體開放閱讀框57抗體

 


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