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客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。

PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：

藍(lán)色犁頭霉DA (Dopamine) ELISA Kit拉丁屬名: Absidia coerulea

聚貪噬菌CRY1 (Cryptochrome 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudomonas mandelii

蘇云金芽孢桿菌OC/BGP (Osteocalcin/Bone Gla Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus thuringiensis

彈性馬鞍菌GSTs (Glutathione S-Transferases) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

植物乳桿菌植物亞種c-jun ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus  plantarum subsp. plantarum

松鼠葡萄球菌松鼠亞種PTGS2/COX-2 (Prostaglandin Endoperoxide Synthase 2) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

蒼白桿菌LN (Laminin) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

喜熱單胞菌屬GLUT4 (Glucose Transporter 4) ELISA Kit拉丁屬名: Caldimonas sp.

鏈輪枝菌CALD (Caldesmon) ELISA Kit用途: 代謝產(chǎn)物具有抗菌活性。

假單胞菌屬CPP (Copeptin) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas  sp

毛木耳CVNPF (Cobra Venom Neuronal Protective Factor) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

枯草芽孢桿菌枯草亞種（現(xiàn)貨）GDI1 (GDP Dissociation Inhibitor 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus  subtilis subsp. subtilis

米舒青霉CSF3/GCSF (Granulocyte Colony Stimulating Factor 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Penicillium miczynskii

根瘤菌CKMT1B (Creatine Kinase, Mitochondrial 1B ) ELISA Kit 用途: 與紫穗槐共生固氮

新城疫病毒C1qR1 (Complement Component 1q Receptor) ELISA Kit 拉丁屬名: Newcastle       disease virus
山羊支原體山羊亞種探針法熒光定量PCR試劑盒 CNN2  平滑肌鈣調(diào)蛋白CNN2抗體苦杏仁苷D(-)-Amygdalin hydrate中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C20H27NO11 分 子 量: 457.43

Wnt16  信號通路Wnt16抗體氯化鈉溶液(1mol/L)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

CMYA2/PDE4DIP  相關(guān)蛋白2大麥芽堿4-(2-(Dimethylamino)ethyl)phenol中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C10H15NO 分 子 量: 165.2322

SFRP2/SARP1  分泌細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白1抗體英西卡林Ethanone,1-(7-methoxy-2,2-dimethyl-2H-1-benzopyran-6-yl)-對照藥材 分 子 式: C14H16O3 分 子 量: 232.27504

SMARCD3  肌動蛋白依賴染色質(zhì)調(diào)控因子SMARCD3蛋白抗體3-beta-O-順式-對-香豆酰馬期里酸3beta-O-trans-p-coumaroylmaslinic acid化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C39H54O6 分 子 量: 618.842

SRFBP1  血清應(yīng)答因子結(jié)合蛋白1抗體戊二醛固定液(2.5%)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

REEP5  受體表達(dá)蛋白5/相關(guān)蛋白抗體福爾馬林-氯化鈉固定液(10%)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式:  分 子 量: