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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
副結核分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒供應商
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:LZR3844
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-17
  • 更新日期: 2025-01-10
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號 LZR3844
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環(huán)步驟

溫度

時間

循環(huán)數(shù)

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

 

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

副結核分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒供應商

Mycobacterium paratuberculosis

LZR3844


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域,其中所述質粒載體為本領域常規(guī)質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

黑腐皮殼菌CENPE (Centromere Protein E) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

衛(wèi)矛擬盤多毛孢F10 (Coagulation Factor X) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

細極鏈格孢CCKAR (Cholecystokinin A Receptor) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

蘋果鏈格孢PKCη (Protein Kinase C Eta ) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

小刺青霉CKMT1A (Creatine Kinase, Mitochondrial 1A ) ELISA Kit 拉丁屬名: Penicillium  spinulosum

雙孢蘑菇CA12 (Carbonic Anhydrase XII) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

大腸埃希菌AKA (Anti-Keratin Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli

青色鏈霉菌ANG I (Angiotensin I) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces   glaucus

褐疣柄牛肝菌CTSB (Cathepsin B) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

枯草芽孢桿菌CDK5 (Cyclin Dependent Kinase 5) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus  subtilis

新城疫病毒IL-8 (Interleukin 8) ELISA Kit拉丁屬名: Newcastle       disease virus

黑曲霉LGALS3BP (Lectin Galactoside Binding, Soluble 3 Binding Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus  niger

裂褶菌CD97 (Cluster of Differentiation 97) ELISA Kit 拉丁屬名: Schizophyllum commune Fr.

木拉克酵母屬HSP-27/HSPB1 (Heat Shock Protein 27) ELISA Kit拉丁屬名: Mrakia blollopis

雞痘病毒PDHβ (Pyruvate Dehydrogenase Beta) ELISA Kit 拉丁屬名: Fowlpox       virus
副結核分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒供應商phospho-CNOT2(Ser101)  磷酸化細胞表面趨化因子受體4相關蛋白2抗體去氫茯苓酸Dehydropachymic acid化學標準品 分 子 式: C33H50O5 分 子 量: 526.7471

CNOT4  細胞表面趨化因子受體4相關蛋白4抗體黃腐酚 D2-Propen-1-one,1-[2,4-dihydroxy-3-(2-hydroxy-3-methyl-3-buten-1-yl)-6-methoxyphenyl]-3-(4-hydroxyphenyl)-,(2E)-對照藥材 分 子 式: C21H22O6 分 子 量:

CNOT6  細胞表面趨化因子受體4相關蛋白6抗體澤瀉醇FDammar-13(17)-en-3-one,16,23-epoxy-11,24,25-trihydroxy-, (8a,9b,11b,14b,16b,23S,24R)-中藥標準品  分 子 式: C30H48O5 分 子 量:

LRSAM1  LRSAM1蛋白抗體桑色素2-(2,4-Dihydroxyphenyl)-3,5,7-trihydroxy-4H-chromen-4-one中藥標準品  分 子 式: C15H10O7 分 子 量: 302.2357

CNOT8  細胞表面趨化因子受體4相關蛋白8抗體樟腦Camphor中藥標準品  分 子 式: C10H16O 分 子 量: 152.23

MURF2  肌肉特異性環(huán)指蛋白2抗體PIPES溶液(1mol/L,pH7.0)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

MURF3  肌肉特異性環(huán)指蛋白3抗體蟾毒它靈Bufotalin中藥標準品  分 子 式: C26H36O6 分 子 量: 444.56

 


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