產地 | 進口、國產 |
品牌 | 聯祖 |
貨號 | LZR3834 |
用途 | 公司產品僅用于科研 |
包裝規格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
牛分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒規格 | Mycobacterium bovis | LZR3834 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環步驟 | 溫度 | 時間 | 循環數 |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產品:
鐮刀菌屬EPHA3 (Ephrin Type A Receptor 3) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
凍土毛霉Anti-Surv (Anti-Survivin Antibody) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
鞘氨盒菌GPI (Glycophosphatidylinositol) ELISA Kit拉丁屬名: Sphingopyxis pacificum
宛氏擬青霉CD99 (Cluster of Differentiation 99) ELISA Kit 拉丁屬名: Paecilomyces variotii
樺剝管孔菌PMN Elastase (Polymorphonuclear Elastase) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
砂單胞菌HO1 (Heme Oxygenase 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Arenimonas manganiresistens
耐寒短桿菌TAT (Thrombin/Antithrombin Complex) ELISA Kit拉丁屬名: Brevibacterium frigoritolerans Delaporte and Sasson
粘紅酵母C1r (Complement Component 1R) ELISA Kit 拉丁屬名: Rhodotorula glutinis (Fresenius) Harrison
紅球菌FN (Fibronectin) ELISA Kit拉丁屬名: Rhodococcus globerulus
白色短波單胞菌LRP (Lung Resistance-Related Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Brevundimonas alba
梭菌MUC3 (Mucin 3) ELISA Kit拉丁屬名: septicum
燕麥鐮孢NUP62 (Nucleoporin 62kDa) ELISA Kit拉丁屬名: Fusarium avenaceum
短密青霉FGFBP2 (Fibroblast Growth Factor Binding Protein 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Penicillium brevicompactum
雞樅(雞菌)β-EP (Beta-Endorphin) ELISA Kit用途: 食、藥菌
枯草芽孢桿菌EphA2 (Tyrosine protein kinase receptor A2) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
牛分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒規格DIP2A/C21orf106 21號染色體開放閱讀框106抗體碘化木蘭花堿4H-Dibenzo[de,g]quinolinium,5,6,6a,7-tetrahydro-1,11-dihydroxy-2,10-dimethoxy-6,6-dimethyl-, iodide (1:1),(6aS)-中藥標準品 分 子 式: C20H24NO4+.I- 分 子 量: 469.31286
MAP-9 微管相關蛋白9抗體間三聯苯1,1':3',1''-Terphenyl化學標準品 分 子 式: C18H14 分 子 量: 230.30376
MAP7D1/RPRC1 精氨酸/脯氨酸富含卷曲蛋白1抗體Tokinolide BSpiro[3H-3a,6-ethanoisobenzofuran-4(1H),1'(3'H)-isobenzofuran]-1,3'-dione,3-butylidene-5,6,6',7'-tetrahydro-5-propyl-, (1'S,3Z,3aS,5R,6R)-中藥標準品 分 子 式: C24H28O4 分 子 量: 380.47672
MKLP1 有絲分裂驅動蛋白樣1抗體7-甲氧基-beta-咔啉-1-丙酸7-Methoxy-b-carboline-1-propionic acid化學標準品 分 子 式: 分 子 量:
NDE1 核分布基因E同源蛋白1抗體楊芽黃素5-Hydroxy-7-methoxy-2-phenyl-4H-chromen-4-one中藥標準品 分 子 式: C16H12O4 分 子 量: 268.26408
NEK9 絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶NEK9抗體4-β-羥基膽固醇4β-Hydroxy Cholesterol中藥標準品 分 子 式: C27H46O2 分 子 量: 402.65294
phospho-NEK9(Thr210) 磷酸化絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶NEK9抗體2-溴聯苯2-Bromobiphenyl 高端化學試劑 分 子 式: C12H9Br 分 子 量: 233.10386