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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
馬立克氏病病毒探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
  • 品牌:聯祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:馬立克氏病病毒探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-13
  • 更新日期: 2025-01-10
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 聯祖
貨號 馬立克氏病病毒探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

 

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。

產品名稱

英文名稱

貨號

馬立克氏病病毒探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

Marek's Disease Virus(MDV)

LZR3799


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

以下列是公司正在熱銷的產品:

大腸埃希氏菌CA4 (Carbonic Anhydrase IV) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli

琉球曲霉GTC (General Transcription Complex) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus luchuensis

近綠曲霉OTF2A (Octamer Transcription Factor 2A) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus  subolivaceus

綠垂曲霉IFABP/FABP2 (Intestinal Fatty Acid Binding Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus viridinutans

球毛殼CYFRA21-1 (Cytokeratin Fragment Antigen 21-1) ELISA Kit拉丁屬名: Chaetomium globosum

直絲淡藍褐鏈霉菌RARα (Retinoic Acid Receptor Alpha) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces coeruleofuscorectus

大腸埃希氏菌PS (Plasma Anticoagulant Protein S) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli

單孢蟲道酵母α Manase (α Mannosidase) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

橘色硬皮馬勃TCC C5b-9 (Terminal Complement Complex C5b-9) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

蛛網不顯枝霉中華變種CDKN3 (Cyclin Dependent Kinase Inhibitor 3) ELISA Kit拉丁屬名: Aphanocladium aranearum var. sinense

需土節桿菌TF (Tissue Factor) ELISA Kit用途: 益生菌

葡萄球菌屬BMP-15 (Bone Morphogenetic Protein 15) ELISA Kit 拉丁屬名: Staphylococcus sp.

草假單胞菌FGF23 (Fibroblast Growth Factor 23) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas  graminis

豌豆根瘤菌Sp100 (Sp100 Nuclear Antigen) ELISA Kit 用途: 共生固氮

沙漠奇異球菌ANG2 (Angiopoietin 2) ELISA Kit拉丁屬名: Deinococcus deserti
馬立克氏病病毒探針法熒光定量PCR試劑盒說明書TRPM3  瞬時受體電位離子通道蛋白3抗體(M亞家族)人參皂苷F4ginsenoside F4中藥標準品  分 子 式: C42H70O12 分 子 量: 766.998

TRPM5  瞬時受體電位離子通道蛋白5抗體(M亞家族)L-蘋果酸(S)-2-hydroxysuccinic acid化學標準品 分 子 式: C4H6O5 分 子 量: 134.08744

TRPM6  瞬時受體電位離子通道蛋白6抗體(M亞家族)1,8-桉葉素Cineole中藥標準品  分 子 式: C10H18O 分 子 量: 154.25

TRPM1  瞬時受體電位離子通道蛋白1抗體(M亞家族)乙酸鈉溶液(3mol/L,pH5.0,無菌)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

TRPM4  瞬時受體電位離子通道蛋白4抗體(M亞家族)五味子酯甲Schisantherin A中藥標準品  分 子 式: C30H32O9 分 子 量: 536.56968

DIS3L  有絲分裂控制樣蛋白DIS3L抗體突厥烯酮Damascenone中藥標準品  分 子 式: C13H18O 分 子 量: 190.28142

DIS3L2  有絲分裂控制蛋白樣DIS3L2抗體丙酮酸鈉溶液(0.1mol/L,無菌)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

 


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