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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3779
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-13
- 更新日期： 2025-01-10
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3779 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
羅布羅布芽生菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒說(shuō)明書(shū) | Loboa lobai | LZR3779 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
橙色單胞菌IL-1β (Interleukin 1 Beta) ELISA Kit 拉丁屬名: Aurantimonas sp.
糞產(chǎn)堿桿菌*IL-6 (Interleukin 6) ELISA Kit拉丁屬名: Alcaligenes Faecalis Caslani et Chalmers
旱生紅曲霉RETN (Resistin) ELISA Kit 拉丁屬名: Monascus eremophilus
空腸彎曲桿菌D2D (D-Dimer) ELISA Kit拉丁屬名: jejuni
熒光假單胞桿菌ACE (Angiotensin I Converting Enzyme) ELISA Kit用途: 無(wú)機(jī)磷細(xì)菌肥料
大腸埃希菌F1+2 (Prothrombin Fragment 1+2) ELISA Kit拉丁屬名: coli
金針菇—金白1號(hào)GSH-Px (Glutathione peroxidase) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
Actinomadura amylolyticaGLP-1 (Glucagon Like Peptide 1) ELISA Kit拉丁屬名: Actinomadura amylolytica sp/ nov/
糙皮側(cè)耳ALP (Alkaline Phosphatase) ELISA Kit拉丁屬名: Pleurotus ostreatus
小麥蒼白桿菌β Manase ELISA Kit拉丁屬名: Ochrobactrum tritici
栗疫菌PIGR/SC (Polymeric Immunoglobulin Receptor/Membrane Secretory Component) ELISA Kit拉丁屬名: Cryphonectria parasitica
腐生葡萄球菌pIκBα (Phospho-Inhibitory Subunit Of NF Kappa B Alpha) ELISA Kit 拉丁屬名: Staphylococcus saprophyticus
豇豆慢生根瘤菌UGCG (UDP-glucose ceramide glucosyltransferase) ELISA Kit用途: 與花生共生固氮
大腸埃希氏菌PARP4 (Poly ADP Ribose Polymerase 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Escherichia coli
耶爾森氏菌FLOT2 (Flotillin 2) ELISA Kit拉丁屬名: Yersinia sp.
羅布羅布芽生菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒說(shuō)明書(shū)phospho-CstF64(Ser498) 磷酸化細(xì)胞分裂相關(guān)蛋白CSTF64抗體赤式-2-(4-烯丙基-2,6-二甲氧基苯氧基)-1-(4-羥基-3-甲氧基苯基)-丙烷-1-醇(+)-erythro-(7R,8S)-delta8'-4,7-dihydroxy-3,3',5'-trimethoxy-8-O-4'-neolignan化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C21H26O6 分 子 量: 374.428
Hemoglobin Beta 血紅蛋白β抗體蠟果楊梅酸 COlean-12-en-28-oic acid,
3,27-bis[[(2E)-3-(3,4-dihydroxyphenyl)-1-oxo-2-propenyl]oxy]-, (3b)-對(duì)照藥材 分 子 式: C48H60O10 分 子 量: 796.984
Desmuslin 中間絲蛋白β-synemin抗體7-O-甲基白楊素中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: 分 子 量:
G Protein alpha Inhibitor 1 G蛋白α抑制蛋白1抗體去氫丹參酮IIAPhenanthro[1,2-b]furan-10,11-dione,6,7-dihydro-1,6,6-trimethyl-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C19H16O3 分 子 量:
DSPP/Dentin phosphophoryn 牙本質(zhì)磷蛋白抗體甘草查爾酮B2-Propen-1-one,3-(3,4-dihydroxy-2-methoxyphenyl)-1-(4-hydroxyphenyl)-, (2E)-中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C16H14O5 分 子 量: 286.27936
Cathepsin S 組織蛋白酶S抗體蕎麥堿3,4-Piperidinediol,2-(hydroxymethyl)-, (2R,3R,4R)-中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C6H13NO3 分 子 量: 147.17232
IGF2BP2/IMP2 樣生長(zhǎng)因子ⅡmRNA結(jié)合蛋白2抗體托品醇壬酸酯Nonanoic acid,8-methyl-8-azabicyclo[3.2.1]oct-3-yl ester, endo- (9CI)化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C17H31NO2 分 子 量: 281.43354
