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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
軍團菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒供應商
  • 品牌:聯祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:LZR3764
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-13
  • 更新日期: 2025-01-10
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 聯祖
貨號 LZR3764
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

 

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。

產品名稱

英文名稱

貨號

軍團菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒供應商

Legionella spp.

LZR3764


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

以下列是公司正在熱銷的產品:

嘴突凸臍蠕孢Monkey MRP (Multidrug Resistance-Associated Protein) ELISA Kit用途: 研究

球毛殼*Monkey GLP-2 (Glucagon Like Peptide 2) ELISA Kit拉丁屬名: Chaetomium globosum Kunze :Fries

金黃桿菌屬Monkey PKN1 (Protein Kinase N1) ELISA Kit 拉丁屬名: Chryseobacterium  yeoncheonense

枯草芽孢桿菌Monkey RHOA (Ras Homolog Gene Family, Memmber A) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus  subtilis

鈉線菌屬Monkey BGN (Biglycan) ELISA Kit拉丁屬名: Natrinema  sp.

萎蔫短小桿菌Monkey PHB (Prohibitin) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

糙皮側耳Monkey RARα (Retinoic Acid Receptor Alpha) ELISA Kit拉丁屬名: Pleurotus ostreatus

金龜子綠僵菌Monkey FBN1 (Fibrillin 1) ELISA Kit 用途: 防治松毛蟲

稍黃鏈霉菌Monkey RLR (Retinoic Acid Inducible Gene/RIG-Like Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces rubiginosus

戊糖乳桿菌Monkey CYTH1 (Cytohesin 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Lactobacillus  pentosus

枯草芽孢桿菌Monkey Anti-Surv (Anti-Survivin Antibody) ELISA Kit  拉丁屬名: Bacillus subtilis

卡利比克畢赤酵母Monkey ALD (Aldolase) ELISA Kit拉丁屬名: Pichia caribbica

長根菇Monkey TJP1 (Tight Junction Protein 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Oudemanciella radicata (Relhan.:Fr.) Sing

榨菜檸檬球菌Monkey PFKM (Phosphofructokinase, Muscle) ELISA Kit拉丁屬名: Citricoccus zhacaiensis

粘紅酵母Monkey VEGF-C (Vascular Endothelial Growth Factor C) ELISA Kit 拉丁屬名: Rhodotorula glutinis (Fresenius) Harrison
軍團菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒供應商BEND4/CCDC4  BEND4蛋白抗體扁塑藤素pristimerin中藥標準品  分 子 式: C30H40O4 分 子 量: 464.642

BEND6  BEND6蛋白抗體靈芝酸GGanoderic acid G中藥標準品  分 子 式: C30H44O8 分 子 量: 532.66556

c-ABL1/2(Tyr393/429)  磷酸化非受體酪氨酸激酶c-Abl抗體L-精氨酸L-Arginine化學標準品 分 子 式: C6H14N4O2 分 子 量: 174.20096

NF-κB p105/p50(Phospho-Ser373)  磷酸化細胞核因子p50/k基因結合核因子抗體溶菌酶(Lysozyme,10mg/ml)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

phospho-C-Myc(Thr373)  磷酸化致癌基因C-Myc抗體五氯苯硫酚Pentachlorothiophenol化學標準品 分 子 式: C6Hscl5 分 子 量: 282.40214

Lin28  RNA結合蛋白LIN28抗體7,2’-二羥基-3’,4’-二甲氧基-異黃烷-7-O-β-D-葡萄糖苷;2’-羥基- 3’,4’-二甲氧基異黃烷-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷b-D-Glucopyranoside,3,4-dihydro-3-(2-hydroxy-3,4-dimethoxyphenyl)-2H-1-benzopyran-7-yl中藥標準品  分 子 式: C23H28O10 分 子 量: 464.46242

Phospho-BRCA1(Ser988)  磷酸化易感基因1抗體McIlvaine緩沖液(pH3.0-8.0)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

 


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